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公开(公告)号：CN102260324B
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201110150794.6
申请日：2011-06-07
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种炎症前期趋化因子拮抗肽及其制备方法和应用，属于基因工程技术领域。所述拮抗肽氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。上述拮抗肽的筛选方法，是用内毒素刺激PBMC细胞产生趋化因子，离心收集上清液，分离纯化趋化因子；以细胞上清液作为靶标，加入噬菌体十二肽库与靶标结合，酸性洗脱液洗脱，筛选出的噬菌体进行扩增，此筛选步骤进行4轮，第4轮不再扩增；对第4轮所得噬菌体进行阳性筛选分析，分别进行结合活性分析、竞争抑制分析和趋化因子生成抑制分析，筛选阳性单克隆噬菌体；对阳性单克隆噬菌体DNA进行测序及序列分析，获得炎症前期趋化因子拮抗肽。本发明的拮抗肽可特异阻断炎症前期趋化因子的分泌，且具有生产成本低，特异性强、功效明确，安全可靠等优点。
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公开(公告)号：CN102260324A
公开(公告)日：2011-11-30
申请号：CN201110150794.6
申请日：2011-06-07
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种炎症前期趋化因子拮抗肽及其制备方法和应用，属于基因工程技术领域。所述拮抗肽氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。上述拮抗肽的筛选方法，是用内毒素刺激PBMC细胞产生趋化因子，离心收集上清液，分离纯化趋化因子；以细胞上清液作为靶标，加入噬菌体十二肽库与靶标结合，酸性洗脱液洗脱，筛选出的噬菌体进行扩增，此筛选步骤进行4轮，第4轮不再扩增；对第4轮所得噬菌体进行阳性筛选分析，分别进行结合活性分析、竞争抑制分析和趋化因子生成抑制分析，筛选阳性单克隆噬菌体；对阳性单克隆噬菌体DNA进行测序及序列分析，获得炎症前期趋化因子拮抗肽。本发明的拮抗肽可特异阻断炎症前期趋化因子的分泌，且具有生产成本低，特异性强、功效明确，安全可靠等优点。
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