公开(公告)号：CN109652449A

公开(公告)日：2019-04-19

申请号：CN201811495616.5

申请日：2018-12-07

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  朱立麒 ,  谢灵志 ,  郭晓宇 ,  朱鸿飞

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/34 ,  C12N15/12 ,  C12N7/01 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种EP153R与EP402R基因共表达重组腺病毒载体构建及腺病毒包装方法，属于基因工程技术领域。一种EP153R基因与EP402R基因过表达腺病毒载体pAD-Shuttle-CMV-CTLA4-EP153R-EP402R，以pShuttle-CMV真核表达载体为基础，在多克隆位点处引入CTLA4、EP153R、EP402R基因。本发明还提供了共表达EP153R、EP402R基因的重组腺病毒，利用构建得到的pAD-Shuttle-CMV-CTLA4-EP153R-EP402R载体实现腺病毒包装过程，得到能够直接感染动物或真核细胞的腺病毒，从而实现了EP153R与EP402R基因在真核细胞中共表达的目的，为研究实现EP153R与EP402R基因共表达的腺病毒疫苗奠定了基础。

公开(公告)号：CN107190100A

公开(公告)日：2017-09-22

申请号：CN201710647055.5

申请日：2017-08-01

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  谢灵志 ,  袁燕 ,  孙靖谕 ,  钱淼 ,  于宁 ,  曹舒扬

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/01

CPC classification number: C12Q1/6851 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2545/113

Abstract: 本发明提供了一种鉴别肝螺杆菌的荧光定量PCR方法，将包含有PCR引物的反应体系进行荧光定量PCR反应；PCR引物包括上游引物和下游引物；反应体系包括以下组分：上游引物，下游引物，SYBR Premix Ex TaqⅡ，ROX Reference DyeⅡ，样品DNA模版，ddH2O；程序包括：95℃30s，95℃5s，52℃30s，72℃30s，40个循环，95℃15s，60℃1min，95℃15s；当Ct值小于33时，检测出肝螺杆菌，当Ct值大于等于33时，未检测出肝螺杆菌。与常规PCR相比，本发明的方法的灵敏度提高了1000倍。

公开(公告)号：CN107227374A

公开(公告)日：2017-10-03

申请号：CN201710646881.8

申请日：2017-08-01

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  孙靖谕 ,  谢灵志 ,  于宁 ,  钱淼

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

CPC classification number: C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2545/114

Abstract: 本发明提供了一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的引物、试剂盒及鉴定方法，属于分子生物学技术领域。本发明提供的引物适用于16S rRNA荧光定量PCR扩增，并且准确地从肝螺杆菌、胆螺杆菌等多种螺杆菌中鉴别出啮齿类螺杆菌，特异性达100％。本发明还提供了一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的试剂盒及其鉴别方法，所述试剂盒方便准确地鉴定啮齿类螺杆菌的存在，操作简便，无需进行琼脂糖凝胶电泳，只需荧光定量PCR仪即可完成，实现快速、大通量诊断和检测，降低了鉴别时间和检测成本，研究表明本发明提供的这一荧光PCR检测方法，灵敏度达30拷贝。

公开(公告)号：CN109735567A

公开(公告)日：2019-05-10

申请号：CN201910046928.6

申请日：2019-01-18

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  黄明生 ,  谢灵志 ,  朱立麒 ,  殷俊

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/66 ,  C12N7/01 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明提供了一种非洲猪瘟EP153R与P54基因共表达的重组腺病毒载体构建及腺病毒包装方法，属于基因工程技术领域。一种EP153R基因与P54基因过表达腺病毒载体，以pShuttle-CMV真核表达载体为基础，在多克隆位点处引入CTLA4、EP153R、P54基因。本发明还提供了共表达EP153R、P54基因的重组腺病毒，利用构建得到的pAD-Shuttle-CMV-CTLA4-EP153R-P54载体实现腺病毒包装过程，得到能够直接感染动物或真核细胞的腺病毒，从而实现了EP153R与P54基因在真核细胞中共表达的目的，为研究实现EP153R与P54基因共表达的腺病毒疫苗奠定了基础。

公开(公告)号：CN108504686A

公开(公告)日：2018-09-07

申请号：CN201810263508.9

申请日：2018-03-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  谢灵志 ,  钱淼 ,  王涛

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/66 ,  C12N15/34 ,  C12N7/01 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒EP153R基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法，属于基因工程技术领域。该方法利用腺病毒穿梭载体 pKO-FH、pAD-EF1a-GFP，经一系列中间过程，得到重组腺病毒表达质粒pAD-EP153R。将最后得到的线性化重组腺病毒载体质粒转染 HEK293 细胞；根据腺病毒感染形成的细胞病变筛选重组病毒，最终实现腺病毒包装过程，并通过扩增、浓缩和鉴定得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒，从而实现了EP153R基因在真核细胞中正常表达的目的，为研究基于表达EP153R的腺病毒载体疫苗奠定基础。

公开(公告)号：CN107475298A

公开(公告)日：2017-12-15

申请号：CN201710809678.8

申请日：2017-09-11

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张泉 ,  谢灵志 ,  于宁 ,  孙靖谕 ,  钱淼

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/66 ,  C12N15/12

CPC classification number: C12N15/86 ,  C07K14/195 ,  C12N15/66 ,  C12N2740/15043

Abstract: 本发明提供了cdtB基因过表达慢病毒载体及其构建方法和包含cdtB基因的慢病毒及其应用，属于基因工程技术领域。一种cdtB基因过表达慢病毒载体pLVX-AcGFP1-N1-cdtB，以pLVX-AcGFP1-N1慢病毒表达载体为基础，在多克隆位点处引入cdtB基因。本发明还提供了含有cdtB基因的慢病毒，利用构建得到的pLVX-AcGFP1-N1-cdtB载体与慢病毒包装体系VSVG、pCMV△R8.2混合，实现慢病毒包装过程，得到能够直接感染真核细胞的慢病毒，从而实现了cdtB基因在真核细胞中正常表达的目的，为进一步了解cdtB基因的功能打好基础。