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公开(公告)号：CN115927213A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202211207209.6
申请日：2022-09-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明本发明属于基因工程疫苗技术领域，具体涉及表达鸡新城疫病毒F基因的重组火鸡疱疹病毒及其构建方法和应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，将含优化的新城疫基因VII型株的F基因与SV40融合表达盒插入HVT US2病毒非复制区。本发明获得的重组病毒rHVT‑Fopt株，在体外可以稳定表达NDV F基因。将重组病毒rHVT‑Fopt免疫1日龄SPF鸡，免疫后28天针对新城疫强毒株的攻击可以产生100％的免疫保护。
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公开(公告)号：CN114134124A
公开(公告)日：2022-03-04
申请号：CN202111318523.7
申请日：2021-11-09
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/45 , C12N15/44 , C12N15/40 , C12N15/869 , A61K39/12 , A61K39/145 , A61K39/17 , A61P31/14 , A61P31/16
Abstract: 本发明提供一种重组火鸡疱疹病毒及其制备方法和应用，具体提供了一种重组火鸡疱疹病毒，在火鸡疱疹病毒基因组的HVT005区和HVT006区之间的间隔区中插入外源基因，所述外源基因选自来自鸡新城疫病毒、禽流感病毒或禽传染性囊病病毒的基因；所述火鸡疱疹病毒基因组的HVT005区和HVT006区之间的间隔区为火鸡疱疹基因组的8867nt‑9319nt之间，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1。本发明首次发现HVT005‑HVT006间隔区可作HVT外源基因插入的位点。利用CRISPR/Cas9技术在HVT基因组HVT005‑HVT006间隔区插入外源基因，可作为鸡新城疫预防和禽流感预防的疫苗候选株。
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公开(公告)号：CN117187196A
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202310898939.3
申请日：2023-07-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/45 , C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/64 , A61K39/295 , A61K39/245 , A61K39/17 , A61P31/14 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达新城疫病毒F基因的重组马立克氏病病毒株及其构建方法和应用，重组病毒株的名称为rCVI988‑F，保藏编号为：CGMCC No.45557；构建方法包括：构建带有绿色荧光基因的CVI988BAC eGFP载体；在CVI988BAC eGFP载体US2基因内部插入Kan‑loxp‑pMLV‑F表达盒，得到含有Kan‑loxp‑pMLV‑F表达盒的重组质粒；将重组质粒转染到CEF细胞中，拯救病毒后，利用cre‑loxp重组系统敲除卡那霉素和BAC序列基因，挑斑纯化，得到重组马立克氏病病毒株。本发明提供的重组病毒株具有良好的遗传稳定性、可以用于制备预防新城疫和鸡马立克氏病的生物制品。
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公开(公告)号：CN116948991A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310898267.6
申请日：2023-07-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N15/90 , C12N15/40 , C12N15/45 , C12N15/113 , A61K39/295 , A61K39/17 , A61K39/12 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种共表达鸡新城疫病毒(NDV)F基因和鸡传染性法氏囊新型变异株(nVarIBDV)VP2基因的重组火鸡疱疹病毒、疫苗及其应用。在先前构建的rHVT‑Fopt的基础上，联合使用CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术和Cre/Lox重组酶系统，将nVarIBDV/SN1905‑2株的VP2基因表达盒插入rHVT‑Fopt重组病毒的US2区，构建了一种HVT载体多联疫苗rHVT‑Fopt‑VP2，它能够同时表达基因VII型NDV的F蛋白和IBDV新型变异株的VP2蛋白。本发明获得的重组病毒rHVT‑Fopt‑VP2株，在体外可以稳定表达NDV F基因和nVarIBDV VP2基因，具有同时防控鸡新城疫和鸡传染性法氏囊病的潜力。
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