公开(公告)号：CN119913203A

公开(公告)日：2025-05-02

申请号：CN202510086500.X

申请日：2025-01-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 韦有恒 ,  刘倩倩 ,  樊伟康 ,  沈苏林 ,  王彦昭 ,  周颖 ,  程阳 ,  陆盈盈

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  A01K67/68 ,  A61K49/00

Abstract: 本发明公开了一种人源TFEB基因转基因果蝇模型的构建方法及应用，构建方法包括如下步骤：S1、将人源TFEB基因编码区序列插入UASp‑HA‑attB载体中，构建UASp‑TFEB‑HA‑attB质粒；S2、将步骤S1构建的质粒导入带attP的果蝇胚胎；S3、将孵化出的G0代果蝇与白眼果蝇杂交，筛选出红眼果蝇，即为UASp‑TFEB‑HA转基因果蝇。本发明利用转基因技术将人源TFEB基因的编码序列导入果蝇中，制备UASp‑TFEB‑HA转基因果蝇；在不同的组织中驱动TFEB的表达，可以诱导细胞出现与哺乳动物细胞中过表达TFEB类似的自噬水平增加等表型，表明TFEB在果蝇中具有和哺乳动物中的生理功能，可以为解析TFEB活化引起的肿瘤发生机制提供良好的模型，也为TFEB活性异常导致的疾病药物筛选提供工具。

公开(公告)号：CN119776433A

公开(公告)日：2025-04-08

申请号：CN202510086502.9

申请日：2025-01-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 韦有恒 ,  刘爽 ,  沈苏林 ,  樊伟康 ,  王彦昭 ,  周颖 ,  程阳 ,  陆盈盈

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/55 ,  C12N15/113 ,  A01K67/0275 ,  A01K67/0276 ,  A61K49/00

Abstract: 本发明公开了一种RagC突变体果蝇的构建方法及应用，构建方法包括如下步骤：将在RagC基因编码区两端设计的gRNA的表达序列插入载体质粒中获得连接质粒；将连接质粒导入表达Cas9蛋白的果蝇胚胎，然后与二号染色体带SM6平衡染色体的果蝇杂交，鉴定筛选出RagC‑/SM6的杂合子果蝇，即为RagC基因缺失突变体果蝇；将结合GTP和GDP的RagC基因的编码区序列分别插入UASp表达质粒，将表达质粒导入表达重组酶的白眼果蝇胚胎，将该果蝇与带有平衡染色体的果蝇进行杂交、筛选，获得RagC转基因果蝇；将RagC基因缺失突变体果蝇与RagC转基因果蝇杂交，获得仅表达突变形式RagC蛋白而无野生型RagC蛋白表达的果蝇，为阐明RagC突变蛋白引起的疾病发生机制提供基础，为临床干预和药物靶点筛选提供思路和工具。