一组靶向干扰IL-33表达的shRNA、重组腺病毒载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN112210556A

    公开(公告)日:2021-01-12

    申请号:CN202011101288.3

    申请日:2020-10-15

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一组靶向干扰IL‑33基因或蛋白表达的shRNA、重组腺病毒载体及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。本发明提供了一组靶向干扰IL‑33基因或蛋白表达的shRNA,其对应的核苷酸序列如SEQ ID NOs:1~3所示。本发明还提供了一组分别包含3个shRNA序列的重组腺病毒载体。将三种重组腺病毒载体分别与穿梭质粒在脂质体和DMEM培养基条件下侵染真核细胞,包装成3种能干扰IL‑33基因表达的重组腺病毒。将三种重组腺病毒共同使用,能有效降低小鼠体内IL‑33基因和蛋白的表达,为深入研究IL‑33作为肝纤维化治疗靶点的机制提供技术支持。

    一种表达非洲猪瘟病毒E183L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法

    公开(公告)号:CN108531511A

    公开(公告)日:2018-09-14

    申请号:CN201810263672.X

    申请日:2018-03-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒E183L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法,属于基因工程技术领域。本发明提供一种表达E183L基因重组腺病毒质粒pAD-E183L,以pAD-EF1α-GFP腺病毒表达载体为基础,在多克隆位点处引入E183L基因。本发明还提供了表达E183L基因的重组腺病毒的制备方法,利用构建得到的pAD-E183L质粒与腺病毒包装体系PEI混合,实现腺病毒包装过程,得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒,从而实现了E183L基因在真核细胞中正常表达的目的,为研究表达E183L基因重组腺病毒载体候选疫苗奠定基础。

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