公开(公告)号：CN110129322B

公开(公告)日：2022-08-26

申请号：CN201910269331.8

申请日：2019-04-04

Applicant: 扬州大学

Inventor： 蒋金金 ,  朱双 ,  王幼平 ,  袁溢 ,  谢涛 ,  曾蕾 ,  杜坤 ,  张顺仓 ,  吴德伟

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/84 ,  A01H5/02 ,  A01H5/08 ,  A01H5/10 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明涉及Bna‑miR393在调控甘蓝型油菜生殖器官发育过程中的应用。具体涉及分离、克隆和应用一种包含Bna‑miR393前体序列（pre‑miR393）的DNA片段，其序列如SEQ ID NO:1所示，序列长度为618 bp，其对应的成熟miRNA序列如SEQ ID NO:2所示。甘蓝型油菜遗传转化的功能分析表明Bna‑miR393参与调控甘蓝型油菜生殖器官的发育，这对于甘蓝型油菜遗传育种改良具有十分重要的意义。

公开(公告)号：CN114369639A

公开(公告)日：2022-04-19

申请号：CN202111579396.6

申请日：2021-12-22

Applicant: 扬州大学

Inventor： 吴德伟 ,  王幼平 ,  杨文文 ,  樊红霞 ,  聂甲玥 ,  吴健 ,  孙勤富

IPC: C12Q1/66 ,  C12N15/82 ,  C12N15/65 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种高效筛选具有植物茉莉素途径抑制功能的病原效应因子的方法，包括以下步骤：构建双荧光素酶报告载体pVSP1‑DL，并转入农杆菌中；将待筛选的效应因子基因片段构建到植物双元超表达载体，并转入农杆菌中；将含有报告载体的农杆菌与含有效应因子超表达载体的农杆菌混合，并注射烟草叶片；使用LUC荧光素酶的底物喷施注射的烟草叶片，进行荧光成像；对烟草注射部位取样，进行LUC和REN双荧光素酶酶活测定。本发明方法可以用简单快速的操作过程和低成本的仪器实现高效率、大批量的筛选抑制茉莉素途径的病原效应因子。

公开(公告)号：CN110129322A

公开(公告)日：2019-08-16

申请号：CN201910269331.8

申请日：2019-04-04

Applicant: 扬州大学

Inventor： 蒋金金 ,  朱双 ,  王幼平 ,  袁溢 ,  谢涛 ,  曾蕾 ,  杜坤 ,  张顺仓 ,  吴德伟

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明涉及Bna-miR393在调控甘蓝型油菜生殖器官发育过程中的应用。具体涉及分离、克隆和应用一种包含Bna-miR393前体序列（pre-miR393）的DNA片段，其序列如SEQ ID NO:1所示，序列长度为618 bp，其对应的成熟miRNA序列如SEQ ID NO:2所示。甘蓝型油菜遗传转化的功能分析表明Bna-miR393参与调控甘蓝型油菜生殖器官的发育，这对于甘蓝型油菜遗传育种改良具有十分重要的意义。

公开(公告)号：CN110106269A

公开(公告)日：2019-08-09

申请号：CN201910269361.9

申请日：2019-04-04

Applicant: 扬州大学

Inventor： 蒋金金 ,  郭图丽 ,  王幼平 ,  王月 ,  王霞琴 ,  蒙贵生 ,  方玉洁 ,  吴健 ,  吴德伟

IPC: C12Q1/6895 ,  C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明涉及Bna-miR156d在控制甘蓝型油菜分枝发育中的应用，具体涉及分离、克隆和应用一种包含Bna-miR156d前体序列的DNA片段，该片段赋予甘蓝型油菜分枝数目增多的能力，其序列如SEQ ID NO:1所示，序列长度为788 bp，其成熟miRNA的序列如SEQ ID NO:2所示。甘蓝型油菜遗传转化的功能分析表明Bna-miR156d参与调控甘蓝型油菜分枝的发育，这对于甘蓝型油菜遗传育种改良具有十分重要的意义。

公开(公告)号：CN109652419A

公开(公告)日：2019-04-19

申请号：CN201811570132.2

申请日：2018-12-21

Applicant: 扬州大学

Inventor： 吴健 ,  王幼平 ,  林俐 ,  孙勤富 ,  刘东晓 ,  方玉洁 ,  蒋金金 ,  吴德伟

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  C12N15/10 ,  A01H5/00 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种受核盘菌诱导的油菜启动子pBnGH、鉴定方法和应用。从甘蓝型油菜（Brassica napus）中分离克隆并鉴定了一个菌核病病原菌核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）诱导启动子。该启动子的核苷酸序列为序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。实验证明，该启动子调控的基因能对核盘菌侵染产生特异性的应答反应，但在油菜和拟南芥的叶片、茎秆、花蕾、角果、种子中表达量极低，仅在根中有一定的表达。此外该启动子不被激素处理和大多数非生物胁迫诱导，仅对高温产生一定的应答反应。利用pBnGH启动子调控抗性基因的表达，仅仅在核盘菌侵袭时才剧烈诱导抗性基因的表达，增强油菜对核盘菌的抵抗能力。

公开(公告)号：CN118480550A

公开(公告)日：2024-08-13

申请号：CN202410582422.8

申请日：2024-05-11

Applicant: 扬州大学 ,  江苏徐淮地区淮阴农业科学研究所

Inventor： 樊红霞 ,  吴德伟 ,  王幼平 ,  吴健 ,  顿小玲

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/10 ,  A01N63/60 ,  A01P3/00

Abstract: 本发明公开了一种防治菌核病的dsRNA及其制备方法和应用，所述dsRNA的序列如SEQ ID NO.1所示。本发明在对潜在的核盘菌效应因子进行了系统克隆，从中筛选出有助于核盘菌侵染的效应因子S201（SS1G_11928），可见S201是核盘菌的关键致病因子。因此，我们根据克隆所得到的S201的序列设计了dsRNA转录引物，转录了名为ds201的dsRNA，并通过将其喷施于烟草叶片后接种核盘菌的实验，验证了ds201的菌核病抑制功能。本发明可以将核盘菌侵染所引起的病斑面积从400~500 mm2左右降低至200~300 mm2左右。

公开(公告)号：CN109652419B

公开(公告)日：2021-04-06

申请号：CN201811570132.2

申请日：2018-12-21

Applicant: 扬州大学

Inventor： 吴健 ,  王幼平 ,  林俐 ,  孙勤富 ,  刘东晓 ,  方玉洁 ,  蒋金金 ,  吴德伟

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  C12N15/10 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  C12Q1/6895

Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种受核盘菌诱导的油菜启动子pBnGH、鉴定方法和应用。从甘蓝型油菜（Brassica napus）中分离克隆并鉴定了一个菌核病病原菌核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）诱导启动子。该启动子的核苷酸序列为序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。实验证明，该启动子调控的基因能对核盘菌侵染产生特异性的应答反应，但在油菜和拟南芥的叶片、茎秆、花蕾、角果、种子中表达量极低，仅在根中有一定的表达。此外该启动子不被激素处理和大多数非生物胁迫诱导，仅对高温产生一定的应答反应。利用pBnGH启动子调控抗性基因的表达，仅仅在核盘菌侵袭时才剧烈诱导抗性基因的表达，增强油菜对核盘菌的抵抗能力。