公开(公告)号：CN114921492A

公开(公告)日：2022-08-19

申请号：CN202210482370.8

申请日：2022-05-05

Applicant: 复旦大学

Inventor： 陈捷亮 ,  袁正宏 ,  李雨檬 ,  叶建宇

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/877 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  A01K67/027 ,  A61K49/00

Abstract: 本发明涉及一种基因打靶载体、I型干扰素受体部分人源化的小鼠模型及其构建方法和应用，其利用基因打靶技术将人源I型干扰素受体蛋白胞外段编码序列准确插入到鼠源I型干扰素受体蛋白跨膜段编码序列前，保留自然状态下编码鼠源I型干扰素受体1/2两亚基的启动子及调控序列，由此建立I型干扰素受体部分人源化的小鼠模型。上述小鼠模型保留鼠源干扰素信号通路的完整性，同时对人源I型干扰素处理有较好应答；对不同人源干扰素亚型处理有不同程度应答；且保留I型干扰素受体组织分布特异性。本发明建立的小鼠模型可成为评价各类病毒感染对I型干扰素敏感性，以及不同亚型和剂型相关I型干扰素制剂的抗病毒作用和抗肿瘤作用等药效的合适模型。

公开(公告)号：CN116426542A

公开(公告)日：2023-07-14

申请号：CN202310328094.4

申请日：2023-03-30

Applicant: 复旦大学

Inventor： 袁正宏 ,  陈捷亮 ,  李雨檬

IPC: C12N15/34 ,  C12N15/70 ,  C12N15/55 ,  G01N33/53 ,  G01N33/569 ,  C12Q1/70 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了用噬菌体单链制备技术体外重组cccDNA分子模型的方法及应用，方法包括R1、构建重组质粒，载体质粒插入部分λ噬菌体基因组，并构建入目标基因组序列；R2、制备单链形式cccDNA，将步骤R1构建的重组质粒转化入大肠杆菌并用VCSM13辅助噬菌体进行感染，包装出基因组上含有目标基因组全长序列的噬菌体，抽提M13噬菌体基因组并引入Zn2+切割后，获得单链形式的cccDNA；R3、体外重组cccDNA，将步骤R2获得的cccDNA正负链退火经连接酶连接修复，即为体外重组cccDNA分子模型；本发明通过噬菌体单链制备系统，经体外重组获得不含有外源序列的cccDNA分子模型的方法，为cccDNA的体内外特性研究提供了一个新技术平台。

公开(公告)号：CN114921492B

公开(公告)日：2024-04-16

申请号：CN202210482370.8

申请日：2022-05-05

Applicant: 复旦大学

Inventor： 陈捷亮 ,  袁正宏 ,  李雨檬 ,  叶建宇

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/877 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  A01K67/0278 ,  A61K49/00

Abstract: 本发明涉及一种基因打靶载体、I型干扰素受体部分人源化的小鼠模型及其构建方法和应用，其利用基因打靶技术将人源I型干扰素受体蛋白胞外段编码序列准确插入到鼠源I型干扰素受体蛋白跨膜段编码序列前，保留自然状态下编码鼠源I型干扰素受体1/2两亚基的启动子及调控序列，由此建立I型干扰素受体部分人源化的小鼠模型。上述小鼠模型保留鼠源干扰素信号通路的完整性，同时对人源I型干扰素处理有较好应答；对不同人源干扰素亚型处理有不同程度应答；且保留I型干扰素受体组织分布特异性。本发明建立的小鼠模型可成为评价各类病毒感染对I型干扰素敏感性，以及不同亚型和剂型相关I型干扰素制剂的抗病毒作用和抗肿瘤作用等药效的合适模型。