基于重组中华乌塘鳢卵黄蛋白原在水体雌激素污染检测方法及应用

    公开(公告)号:CN110726847B

    公开(公告)日:2020-12-08

    申请号:CN201911060062.0

    申请日:2019-11-01

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 基于重组中华乌塘鳢卵黄蛋白原在水体雌激素污染检测方法及应用,涉及环境污染检测和免疫学领域,公开了一种基于重组中华乌塘鳢卵黄蛋白原(Vitellongenin,VTG),利用重组蛋白作为抗原制备多克隆抗体。建立检测VTG快速准确的免疫检测方法。利用该方法检测被17‑β雌二醇(E2)诱导的雄性青鳉鱼,发现被E2诱导的雄鱼VTG水平比未诱导雄鱼VTG水平明显升高,利用该方法鉴定雌雄鱼发现雌鱼体内VTG明显高于雄鱼。差异极显著,该技术可以用于环境雌激素污染的监测和雌雄鱼的鉴别。

    中华乌塘鳢卵黄蛋白原重组表达及纯化方法

    公开(公告)号:CN110655565B

    公开(公告)日:2021-08-17

    申请号:CN201911059553.3

    申请日:2019-11-01

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 周克夫 孟坤 龙敏

    Abstract: 中华乌塘鳢卵黄蛋白原重组表达及纯化方法,涉及融合蛋白表达纯化方法技术领域,提供一种基于中华乌塘鳢卵黄蛋白原基因,克隆其部分基因并体外重组质粒,转入大肠杆菌进行原核表达,IPTG诱导温度为16℃条件下获得高效融合表达,并且表达目的蛋白以可溶性状态存在,目的蛋白占细菌可溶性蛋白总量25%以上。应用纯化技术获得融合蛋白MNP‑VTG,通过蔗糖酶酶切将标签MNP从融合蛋白中分离获得目的蛋白VTG单体。该方法表达高效纯化VTG简便,因是可溶性,分离比包涵体简单,无需复性。获得的重组VTG为后续应用提供了稳定均一的原料基础。给重组蛋白可以用于生物活性功能研究,亦可以制备相应抗体开展检测研究。

    重组人胸腺素α原蛋白在制备眼角膜损伤修复药物中的应用

    公开(公告)号:CN108159402B

    公开(公告)日:2020-03-24

    申请号:CN201711387544.8

    申请日:2017-12-20

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 重组人胸腺素α原蛋白在制备眼角膜损伤修复药物中的应用,涉及胸腺素α原。将重组ProTα应用于机械损伤的眼球表面,动物实验结果显示,低浓度ProTα能够有效促进正常小鼠眼球表面角膜组织受机械损伤后的修复。重组人胸腺素α原蛋白可在制备眼角膜损伤修复药物中应用。所述胸腺素α原为重组人胸腺素α原和提取的胸腺素α原。所述胸腺素α原可在眼球表皮组织机械损伤修复中应用。所述胸腺素α原通过增加结膜杯状细胞数量以及抑制炎症达到促进伤口愈合作用。

    中华乌塘鳢卵黄蛋白原重组表达及纯化方法

    公开(公告)号:CN110655565A

    公开(公告)日:2020-01-07

    申请号:CN201911059553.3

    申请日:2019-11-01

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 周克夫 孟坤 龙敏

    Abstract: 中华乌塘鳢卵黄蛋白原重组表达及纯化方法,涉及融合蛋白表达纯化方法技术领域,提供一种基于中华乌塘鳢卵黄蛋白原基因,克隆其部分基因并体外重组质粒,转入大肠杆菌进行原核表达,IPTG诱导温度为16℃条件下获得高效融合表达,并且表达目的蛋白以可溶性状态存在,目的蛋白占细菌可溶性蛋白总量25%以上。应用纯化技术获得融合蛋白MNP-VTG,通过蔗糖酶酶切将标签MNP从融合蛋白中分离获得目的蛋白VTG单体。该方法表达高效纯化VTG简便,因是可溶性,分离比包涵体简单,无需复性。获得的重组VTG为后续应用提供了稳定均一的原料基础。给重组蛋白可以用于生物活性功能研究,亦可以制备相应抗体开展检测研究。

    重组人胸腺素alpha原蛋白在制备伤口愈合药物中的应用

    公开(公告)号:CN103230586A

    公开(公告)日:2013-08-07

    申请号:CN201310167295.7

    申请日:2013-05-08

    Abstract: 重组人胸腺素alpha原蛋白在制备伤口愈合药物中的应用,涉及重组人胸腺素alpha原蛋白。将重组胸腺素alpha原应用于伤口创面,动物和体外实验结果显示,胸腺素alpha原能够促进正常小鼠伤口愈合,糖尿病小鼠伤口愈合。体外培养人脐带静脉血管内皮细胞划线后,添加胸腺素alpha原能够显著促进划线的愈合。胸腺素alpha原应用于伤口愈合尤其是糖尿病伤口愈合药物用途有重要意义。胸腺素α原为重组人胸腺素α原和提取的胸腺素α原。胸腺素α原通过降低MMP-9和TIMP-1水平,从而降低MMP-9/TIMP-1比值。胸腺素α原通过增加胶原纤维表达水平达到促进伤口愈合作用。

    胸腺素α1的一种新用途
    6.
    发明授权

    公开(公告)号:CN101361962B

    公开(公告)日:2012-05-23

    申请号:CN200810071912.2

    申请日:2008-10-07

    Abstract: 胸腺素α1的一种新用途,涉及胸腺素α1。提供胸腺素α1的一种新用途。所述的胸腺素α1用于制备糖尿病药物。通过动物实验证实,胸腺素α1不仅能够减缓小鼠体重的增加,降低正常小鼠空腹血糖值,明显增强小鼠的糖耐量作用,而且能够抵抗STZ诱导小鼠糖尿病的发生;此外对于保护胰岛细胞结构和胰岛素的分泌水平具有重要作用。本发明所述的胸腺素α1可用于维持正常糖代谢,保护胰岛细胞结构和功能;通过口服胸腺素α1的方法,还能够明显减缓体重增加的功效,因此胸腺素α1可在制备预防糖尿病发生和治疗糖尿病的药物和临床上应用。

    抗氧化及预防糖尿病发生的融合蛋白的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN101096385A

    公开(公告)日:2008-01-02

    申请号:CN200710009084.5

    申请日:2007-06-08

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 周克夫 李俊燕

    Abstract: 抗氧化及预防糖尿病发生的融合蛋白的制备方法,涉及一种融合蛋白。根据ProTα的基因序列,设计上下游引物P1和P2,将P1引入BamHI酶切位点,将P2引入EcoRI酶切位点。采用RT-PCR方法得前胸腺素α原全长基因cDNA,将PCR产物纯化后与pMD18-T Vector连接,转化DH5α感受态细胞,对7个单克隆基因序列和参考的proTα的基因序列比对。用EcoRI和BamHI双酶切ProTα PCR产物,将ProTα基因片断插入经同样双酶切的原核表达载体pGEX 6P-1中,转化大肠杆菌得转基因BL21菌株,培养后加入IPTG诱导表达,菌液离心后的沉淀用上样缓冲液溶解,离心取上清电泳。

    一种处理草甘膦废水的方法

    公开(公告)号:CN113772776A

    公开(公告)日:2021-12-10

    申请号:CN202110986230.X

    申请日:2021-08-26

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 周克夫 龙敏

    Abstract: 一种处理草甘膦废水的方法,涉及废水处理。将草甘膦废水加入MIL‑88A以及H2O2,短暂的吸附反应后,少量多次加入低浓度H2O2,可以在可见光照射30min内达到98%的降解率,并且降解产物中只有少量的氨甲基磷酸和甘氨酸残余。通过少量多次加入低浓度H2O2达到减少H2O2使用量和提高降解效率的目的,使用非均相Fenton反应代替均相Fenton反应可以将MIL‑88A重复利用,可以减少降解费用,使用太阳光降解,大大降低能耗,从而进一步扩大使用范围。

    中华乌塘鳢卵黄蛋白原全长基因及克隆方法与应用

    公开(公告)号:CN110628777A

    公开(公告)日:2019-12-31

    申请号:CN201911060054.6

    申请日:2019-11-01

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 周克夫 孟坤

    Abstract: 本发明涉及分子生物学和环境科学领域,公开了一种中华乌塘鳢卵黄蛋白原全长基因及其克隆方法与应用,具有VTG基因序列如SEQ1所示和氨基酸序列如SEQ2。本发明首次获得对环境变化敏感的中华乌塘鳢卵黄蛋白原全长基因,填补了中华乌塘鳢基因组的空白,同时由于该基因是在E2刺激下诱导雄鱼获得的VTG基因,因此,该基因的表达与环境激素的刺激直接相关,该基因的调控和蛋白更能够反应环境激素的污染现状。因此,该基因及蛋白作为环境雌激素的生物标记物对环境监测和评价更准确和实用。同时对更深入研究VTG蛋白在环境激素作用下的表达作用和应用具有理论和实践意义。

    拟中肋骨条藻的快速检测方法及试纸条的制备与使用方法

    公开(公告)号:CN109085356A

    公开(公告)日:2018-12-25

    申请号:CN201810893079.3

    申请日:2018-08-07

    CPC classification number: G01N33/577 G01N33/558

    Abstract: 拟中肋骨条藻的快速检测方法及试纸条的制备与使用方法,涉及基于胶体金免疫层析分析技术的浮游藻类免疫层析检测。提供拟中肋骨条藻的免疫层析检测分析试纸条、拟中肋骨条藻的免疫层析检测分析试纸条的制备方法、拟中肋骨条藻的免疫层析检测分析试纸条的使用方法和拟中肋骨条藻的免疫层析检测方法。通过免疫学技术,以藻细胞免疫实验动物,制备浮游藻的单克隆抗体,利用抗体,建立GICA的免疫分析方法。又通过比色板,对GICA的显色结果进行较别,估算出赤潮藻在水体当中的浓度。直接将含藻的水样滴加到试纸条上即可获得结果阳性,并且可以根据反应的的强弱给出藻细胞浓度的大致数值结果。

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