公开(公告)号：CN101096385A

公开(公告)日：2008-01-02

申请号：CN200710009084.5

申请日：2007-06-08

Applicant: 厦门大学

Inventor： 周克夫 ,  李俊燕

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/09 ,  C12N1/21 ,  A61K38/16 ,  A61P3/10

Abstract: 抗氧化及预防糖尿病发生的融合蛋白的制备方法，涉及一种融合蛋白。根据ProTα的基因序列，设计上下游引物P1和P2，将P1引入BamHI酶切位点，将P2引入EcoRI酶切位点。采用RT-PCR方法得前胸腺素α原全长基因cDNA，将PCR产物纯化后与pMD18-T Vector连接，转化DH5α感受态细胞，对7个单克隆基因序列和参考的proTα的基因序列比对。用EcoRI和BamHI双酶切ProTα PCR产物，将ProTα基因片断插入经同样双酶切的原核表达载体pGEX 6P-1中，转化大肠杆菌得转基因BL21菌株，培养后加入IPTG诱导表达，菌液离心后的沉淀用上样缓冲液溶解，离心取上清电泳。

公开(公告)号：CN101096384A

公开(公告)日：2008-01-02

申请号：CN200710009083.0

申请日：2007-06-08

Applicant: 厦门大学

Inventor： 周克夫 ,  李俊燕

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/09 ,  C12N1/21 ,  A61K38/16 ,  A61K39/00 ,  A61P35/00

Abstract: 一种抗肿瘤融合蛋白的制备方法及其应用，涉及一种融合蛋白。根据ProTα的基因序列，设计上下游引物P1和P2，P1引入BamHI酶切位点，P2引入EcoRI酶切位点。用RT-PCR方法得前胸腺素α原全长基因cDNA，PCR产物纯化后与pMD18-T Vector连接，转化DH5α感受态细胞，对7个单克隆基因序列和参考的proTα的基因序列比对。用EcoRI和BamHI双酶切ProTα PCR产物，将ProTα基因片断插入经同样双酶切的原核表达载体pGEX 6P-1中，转化大肠杆菌BL21，加入IPTG，诱导表达，菌液离心后的沉淀用上样缓冲液溶解，离心取上清电泳，得GST-Proα融合蛋白。