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公开(公告)号：CN119039406A
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202411186696.1
申请日：2024-08-28
Applicant: 南昌大学第一附属医院
Abstract: 本发明公开了一种肺炎克雷伯菌铁载体蛋白fecA3的纯化方法，包括如下步骤，（1）fecA3重组载体转化；（2）fecA3蛋白诱导表达与检测；（3）取诱导后菌液1mL，离心收集菌体，与未诱导对照一同进行SDS‑PAGE分析，检测fecA3蛋白的表达；（4）Ni柱亲和层析纯化；（5）蛋白复性与浓缩；（6）纯化与复性后fecA3蛋白的鉴定；（7）质谱鉴定：利用LC‑MS/MS质谱技术对纯化的fecA3蛋白进行了鉴定。本发明解决了纯度差及产量低的问题，本发明通过截断一段肺炎克雷伯菌种属fecA3蛋白特有的信号肽的方案，大大降低fecA3蛋白的疏水性，成功的对肺炎克雷伯菌的fecA3蛋白进行纯化，并且质谱鉴定成功表达，且纯度达到99.7%，且分子量与预期相符。
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公开(公告)号：CN118600064A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202411074336.2
申请日：2024-08-07
Applicant: 南昌大学第一附属医院
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12N15/11 , C12Q1/24 , G01N33/569 , G01N33/543 , C12R1/22
Abstract: 本发明公开了一种高毒力耐药肺炎克雷伯菌的检测方法，所述方法包括制备刀豆蛋白A‑磁性纳米粒子复合物；使用所述刀豆蛋白A‑磁性纳米粒子复合物富集肺炎克雷伯菌；将所述目标溶液投入所述RPA反应体系中扩增肺炎克雷伯菌核酸；将所述RPA反应液投入所述CRISPR Cas12a检测体系中切割扩增所得核酸，以得到检测溶液；对检测溶液进行检出限判定或荧光检测，输出检测结果。本发明可以在实际临床工作中更快速、特异性地检测目的菌肺炎克雷伯菌核酸，测定效率高、操作简便、检测时间短。
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公开(公告)号：CN117646079A
公开(公告)日：2024-03-05
申请号：CN202311770952.7
申请日：2023-12-21
Applicant: 南昌大学第一附属医院
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/532 , C12N15/11 , C12R1/22
Abstract: 本发明公开了一种检测高毒力耐药肺炎克雷伯菌的方法，具体包括目标菌的富集、核酸提取、环介导等温扩增和数据分析步骤，属于生物检测技术领域。本发明针对高毒力耐药肺炎克雷伯菌的毒力基因peg‑344和耐药基因kpc‑2设计了特异性引物，构建的多重LAMP反应体系特异性强、灵敏度高、结果判定简单，可在63℃45min内出结果。另一方面，本发明制备了链霉亲和素包被的磁性纳米粒子复合物通过其与生物素化抗体结合进行目的菌的捕获，分离效率更高，不仅消除了检测基质的影响还缩短了富集时间，使整体检测时间缩短至2h以内。本发明的方法可对高毒力耐药肺炎克雷伯菌进行快速检测，在流行病学上有重要意义，可在基层医疗单位、基层防疫部门进一步推广。
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公开(公告)号：CN115015338B
公开(公告)日：2023-11-07
申请号：CN202210542382.5
申请日：2022-05-18
Applicant: 南昌大学第一附属医院
Abstract: 本发明公开了一种用于分离并检测肺炎克雷伯菌的复合材料，复合材料包括磁性纳米材料复合物和免疫传感材料所述磁性纳米材料复合物由氨曲南和磁性纳米材料偶联而成；免疫传感材料由肺炎克雷伯菌单克隆抗体、羧基功能化石墨烯和玻碳电极组成，本发明采用氨曲南通过氨基与磁性纳米材料表面羧酸相连，然后通过氨曲南的β‑内酰胺键可与肺炎克雷伯菌细胞膜表面的青霉素结合蛋白(PBPs)结合，实现功能化磁性纳米材料对肺炎克雷伯菌的磁分离。
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公开(公告)号：CN114993968A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210542729.6
申请日：2022-05-18
Applicant: 南昌大学第一附属医院
Abstract: 本发明公开了一种院感病原菌的检测试剂盒及检测方法。属于生物技术领域。该试剂盒包括如下成分：功能化免疫磁性纳米材料AMBs和信号探针MPBA‑AuNPs；其中，功能化免疫磁性纳米材料AMBs为将院感病原菌的抗体与磁珠偶连制备而成；信号探针MPBA‑AuNPs为将具有结合院感病原菌能力的识别元件巯基‑苯硼酸MPBA连接至金纳米粒子AuNPs表面制备而成。本发明可以在低梯度磁场下从复杂基质中快速、特异性分离目的菌，捕获效率高、操作简便、分离时间短；将识别元件巯基‑苯硼酸MPBA与金纳米粒子AuNPs连接，作为信号探针MPBA‑AuNPs，实现院感病原菌的快速、高灵敏检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114814212A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210542727.7
申请日：2022-05-18
Applicant: 南昌大学第一附属医院
IPC: G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种分离尿液中大肠埃希氏菌的试剂盒及制备方法，属于生物技术领域。本发明方法包括纳米磁珠与抗菌肽(硫酸多粘菌素B)进行偶联、抗菌肽修饰的纳米磁珠复合物溶液捕获样品液中的大肠埃希氏菌，通过外加磁场的作用，将被捕获大肠埃希氏菌与样品液进行分离及重悬等步骤。本发明通过磁分离捕获到的大肠埃希氏菌可以直接进行后续分析；具有富集效率高，特异性好，成本低的优点，无需昂贵的仪器设备，可以在基层医院推广使用。
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公开(公告)号：CN119197340A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202311105611.8
申请日：2023-08-30
Applicant: 南昌大学第一附属医院
Abstract: 本发明提供了一种PCR八连管检测装置及方法，其中遮光器上端为锥形台，遮光器内设有两个遮光板，利用锥形台的定型作用将PCR管侧壁的检测盲区在腔体内处于敞开暴露状态，腔体内两个遮光板组成的扇形区域使PCR管的一侧与连接器内腔形成光通路，光源器件的光路透过PCR管一侧的局部管壁并进入扇形区域中，而后经连接器内腔作用于传感头，令局部管壁的透光强度被光照强度传感器接收，扭转连管朝向使PCR管各处管壁的局部透光光线先后进入扇形区，并被传感器单独检测，即可准确检测PCR管的各处壁厚及其均一性，此方式可针对PCR管体所特有的连管结构进行全面性的壁厚检测，消除检测盲区并提高测量范围及精度，确保PCR实验的正常追溯排查及优化调整。
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公开(公告)号：CN118823774A
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202411147067.8
申请日：2024-08-21
Applicant: 南昌大学第一附属医院
IPC: G06V20/69 , G06V10/20 , G06V10/26 , G06V10/52 , G06V10/80 , G06V10/764 , G06V10/82 , G06N3/042 , G06N3/0464 , G06N3/048 , G06T7/00 , G06T3/4053 , G06T3/4007 , G06N3/0475 , G06N3/045 , G06N3/094
Abstract: 本发明公开了一种基于图像特征分析的细菌显微图像识别方法，涉及生物医学成像技术领域，包括，采集细菌显微图像并进行预处理；利用自适应超分辨率重建技术对预处理后的图像进行重建，得到重建后的高分辨率显微图像；从重建后的高分辨率显微图像中提取多尺度特征，形成特征图；采用图像分割技术，从特征图中分割出单个细菌实例，得到分割后的菌落图；基于分割后的菌落图构建菌落关系模型，输出每个细菌的分类结果；对每个细菌的分类结果进行后处理，并与标准数据库进行比较，输出细菌分类报告。精确分割出单个细菌实例，为构建菌落关系模型提供了关键的数据基础，增强了细菌分类的准确性和可靠性。
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公开(公告)号：CN115181782A
公开(公告)日：2022-10-14
申请号：CN202210963859.7
申请日：2022-08-11
Applicant: 南昌大学第一附属医院
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6886
Abstract: 本发明公开了一种高通量特异性捕获miRNA的DNA载体制备方法及其应用。属于液体活检技术领域。包括以下步骤：环状DNA支架链的线性化；设计miRNA特异性检测探针；双链DNA载体的组装。本发明通过在线性M13DNA支架链上设计互补结合的骨架寡核苷酸及两个检测探针，实现高通量特异性捕获目的miRNA，与未经设计的DNA载体相比，有精准捕获、高特异性的优势。利用发明制备的DNA载体可用于捕获及检测癌症相关的外周血和生物组织的miRNAs。
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公开(公告)号：CN115058359A
公开(公告)日：2022-09-16
申请号：CN202210678702.X
申请日：2022-06-15
Applicant: 南昌大学第一附属医院
Abstract: 本发明公开了一种磁分离富集蜡样芽胞杆菌的方法，属于生物技术领域。本发明方法包括磁性纳米粒子与链霉亲和素的偶联，羧酸‑聚乙二醇‑生物素与头孢吡肟的偶联，头孢吡肟‑羧酸‑聚乙二醇‑生物素与样品液中的蜡样芽孢杆菌共孵育并结合在菌体表面，链霉亲和素修饰的磁性纳米粒子与样品液中的蜡样芽胞杆菌～头孢吡肟‑羧酸‑聚乙二醇‑生物素结合，在外加磁场的作用下，将捕获的蜡样芽孢杆菌与样品液进行分离及重悬等步骤。通过磁分离捕获到的蜡样芽孢杆菌可以直接进行后续分析；与传统的细菌磁分离方法相比，该方法不仅提高了样品中蜡样芽孢杆菌分离效率，同时也降低了成本。
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