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公开(公告)号:CN109825627B
公开(公告)日:2019-10-22
申请号:CN201910241234.8
申请日:2019-03-28
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种RPA‑侧流层析检测丁香疫霉的引物和探针组合及其应用。本发明所使用的引物探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在检测区的有阳性反应,增加了检测的灵敏性。本发明系首次采用RPA层析技术建立快速检测丁香疫霉的方法,并通过特异性和灵敏度评价,可用于实际样品检测,同时为检疫性疫霉菌的检测提供了新的技术平台,在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对出入境水果中的丁香疫霉进行检测。本发明对丁香疫霉引起的疫病和对减少农药盲目使用,降低生产成本,减少农药的环境污染也具有重要意义。
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公开(公告)号:CN109897910A
公开(公告)日:2019-06-18
申请号:CN201910230115.2
申请日:2019-03-25
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于RPA-侧流层析试纸条技术快速精准检测尖镰孢菌的方法,包括1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用侧流层析试纸条进行扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有尖镰孢菌;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有尖镰孢菌。本发明所使用的引物探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在检测区的有阳性反应,增加了检测的灵敏性,为尖镰孢菌的检测提供了新的技术平台,同时在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对苗圃地或者发病植株中的尖镰孢菌进行检测。
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公开(公告)号:CN109988860B
公开(公告)日:2022-08-30
申请号:CN201910194831.X
申请日:2019-03-14
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种用于检测冬生疫霉的引物及探针组合物及其试剂盒和检测方法,该引物和探针序列为:RPA‑PSYPT‑F:5'‑TTCCACCCTTCCACCAGACTGCTGAGGAGG‑3',RPA‑PSYPT‑R:5’‑[Biotin]TGTTAGCTGCGTGTTCGTTGGTCACCCCAGA‑3’,SYPT‑P:5’‑[FAM]CTTCTGTGATTTATCCAGAAAATCCGTACGAT‑THE‑GAGCTGGACGGCAAGA[C3‑spacer]‑3’。本发明所使用的引物探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在检测区的有阳性反应,增加了检测的灵敏性。
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公开(公告)号:CN109825628A
公开(公告)日:2019-05-31
申请号:CN201910241240.3
申请日:2019-03-28
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于RPA-侧流层析技术检测茄腐镰孢菌的引物及探针组合及其应用。所述应用具体为:1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用侧流层析试纸条进行扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有茄腐镰孢菌;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有茄腐镰孢菌。本发明所使用的引物及探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在质控区有阳性对照,增加了检测的灵敏性,为茄腐镰孢菌的检测提供了新的技术平台,同时在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对苗圃地或者发病植株中的茄腐镰孢菌进行检测。
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公开(公告)号:CN109825627A
公开(公告)日:2019-05-31
申请号:CN201910241234.8
申请日:2019-03-28
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种RPA-侧流层析检测丁香疫霉的引物和探针组合及其应用。本发明所使用的引物探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在检测区的有阳性反应,增加了检测的灵敏性。本发明系首次采用RPA层析技术建立快速检测丁香疫霉的方法,并通过特异性和灵敏度评价,可用于实际样品检测,同时为检疫性疫霉菌的检测提供了新的技术平台,在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对出入境水果中的冬生疫霉进行检测。本发明对丁香疫霉引起的疫病和对减少农药盲目使用,降低生产成本,减少农药的环境污染也具有重要意义。
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公开(公告)号:CN109943624A
公开(公告)日:2019-06-28
申请号:CN201910194830.5
申请日:2019-03-14
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6895 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种基于RPA-侧流层析技术检测大豆疫霉的方法及其专用引物及探针组合,该方法包括1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用侧流层析试纸条进行扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有大豆疫霉;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有大豆疫霉。本发明所使用的引物探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在检测区的有阳性反应,增加了检测的灵敏性,为检疫性疫霉菌的检测提供了新的技术平台,同时在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对出入境大豆中的大豆疫霉进行检测。
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公开(公告)号:CN109825628B
公开(公告)日:2019-10-18
申请号:CN201910241240.3
申请日:2019-03-28
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于RPA‑侧流层析技术检测茄腐镰孢菌的引物及探针组合及其应用。所述应用具体为:1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用侧流层析试纸条进行扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有茄腐镰孢菌;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有茄腐镰孢菌。本发明所使用的引物及探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在质控区有阳性对照,增加了检测的灵敏性,为茄腐镰孢菌的检测提供了新的技术平台,同时在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对苗圃地或者发病植株中的茄腐镰孢菌进行检测。
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公开(公告)号:CN109988860A
公开(公告)日:2019-07-09
申请号:CN201910194831.X
申请日:2019-03-14
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种用于检测冬生疫霉的引物及探针组合物及其试剂盒和检测方法,该引物和探针序列为:RPA‑PSYPT‑F:5'‑TTCCACCCTTCCACCAGACTGCTGAGGAGG‑3',RPA‑PSYPT‑R:5’‑[Biotin]TGTTAGCTGCGTGTTCGTTGGTCACCCCAGA‑3’,SYPT‑P:5’‑[FAM]CTTCTGTGATTTATCCAGAAAATCCGTACGAT‑THE‑GAGCTGGACGGCAAGA[C3‑spacer]‑3’。本发明所使用的引物探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在检测区的有阳性反应,增加了检测的灵敏性。
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