公开(公告)号：CN109924129A

公开(公告)日：2019-06-25

申请号：CN201910292853.X

申请日：2019-04-11

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 朱丽华 ,  夏馨蕊 ,  沈李元 ,  方天雨 ,  杨帆 ,  叶建仁 ,  吴小芹

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种评价松树愈伤组织对松材线虫抗性的方法，其特征在于，利用无菌松材线虫对所诱导的松树胚性细胞系进行接种，通过愈伤组织外观形态变化、TTC细胞化学染色结果、线虫种群增长速率，比较不同细胞系对松材线虫的响应，从而筛选出抗性细胞系，淘汰敏感细胞系，实现在愈伤组织阶段就对松树胚性细胞的抗松材线虫特性进行早期评价。本发明利用无菌松材线虫对所诱导的松树胚性细胞系进行接种，通过愈伤组织外观形态变化、TTC细胞化学染色结果、线虫种群增长速率，比较不同细胞系对松材线虫的响应，从而筛选出抗性细胞系，淘汰敏感细胞系，在愈伤组织阶段就对其抗松材线虫特性进行早期评价，是一种简便、快速的愈伤组织抗松材线虫特性评价方法。

公开(公告)号：CN110050784A

公开(公告)日：2019-07-26

申请号：CN201910437126.8

申请日：2019-05-23

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 吴小芹 ,  沈李元 ,  叶建仁 ,  陈婷婷

IPC: A01N3/00 ,  A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种抗松材线虫病马尾松胚性愈伤组织超低温保存方法，属于组培技术领域。本发明通过适当的预处理与采用混合型冷冻保护剂更适合于抗性马尾松胚性愈伤组织的冷冻保存，且在30-35℃解冻后的胚性愈伤组织细胞活性最高达100％，超低温保存后的愈伤与正常增殖的愈伤组织在外观及显微结构上无明显差异，且低温保存后的愈伤组织仍具有分化形成体胚的能力。本申请初步建立了抗松材线虫病马尾松胚性愈伤组织的超低温保存体系，为抗性马尾松胚性愈伤组织胚性的长期维持提供了技术参考。

公开(公告)号：CN107593454A

公开(公告)日：2018-01-19

申请号：CN201711068986.6

申请日：2017-11-03

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 吴小芹 ,  陈婷婷 ,  叶建仁 ,  沈李元

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种抗松材线虫病马尾松体细胞胚胎发生和植株再生方法，以抗松材线虫病马尾松未成熟合子胚为材料，经胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织的增殖与维持、分化成熟以及萌发，并对体细胞胚进行生根诱导、再生植株进行壮苗培养以及驯化移栽，最终获得抗松材线虫病马尾松植株。本发明的抗松材线虫病马尾松体细胞胚胎发生和植株再生方法，以抗性马尾松未成熟合子胚为材料，初步建立了抗性马尾松体细胞胚胎发生再生体系，对抗性马尾松胚性愈伤组织诱导进行优化，进一步研究了体细胞胚增殖、分化、萌发、再生植株移栽驯化等重要环节，培育出小批量的抗病马尾松悬浮培养及体细胞胚胎发生再生植株，为抗性马尾松的工厂化生产奠定了良好的技术基础。