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公开(公告)号：CN114934101A
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202210676568.X
申请日：2022-06-15
Applicant: 南京大学
IPC: C12Q1/6844 , G16B5/00
Abstract: 本发明涉及一种解决EXPAR序列依赖性的方法，该方法是采用耐高温的切刻酶，在模板3’端修饰LNA和在模板5’端截掉部分碱基。具体为先将传统EXPAR方法所用的切刻酶替换为耐高温的切刻酶得到相应初始扩增模板，之后通过在模板的3’端修饰锁核酸(LNA)来增加双链结合的稳定性，在模板5’端截掉部分碱基来优化扩增中的动力学特征，最终得到用于目标序列进行EXPAR等温扩增的模板。该序列依赖性解决方法可以实现长度在15‑25碱基范围内短序列的普适性检测，快速，高效，易于操作，是首次提出的系统性解决EXPAR等温扩增技术的序列依赖性问题的方法，并为其他等温扩增技术的改善提供了参考价值，具有在核酸检测和信号放大等领域的应用前景。
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