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公开(公告)号：CN117554458A
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202210920378.8
申请日：2022-08-03
Applicant: 南京大学
IPC: G01N27/62
Abstract: 本发明涉及一种活细胞分泌酶的原位质谱检测方法。该方法中，质谱探针由2纳米的金纳米粒子与包含底物多肽及连接多肽(5∶1)的溶液反应，再将DSPE‑PEG‑DBCO接到连接多肽上制得。检测过程首先将质谱探针上的DSPE基团通过10分钟孵育嵌入细胞膜，将其锚定在细胞表面，随后探针上的酶底物多肽快速捕获从细胞内分泌到膜外的酶，用基质辅助激光解吸离子化‑时间飞行质谱(MALDI‑TOF MS)检测细胞表面保留的底物与被剪切的产物，由I产物/(I产物+I底物)获得剪切效率，通过剪切效率与酶浓度的标准曲线，获得分泌酶的量。该策略简单、快速，具有普适性，可用于多种细胞酶分泌的同时定量检测，具有广阔的应用前景。
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