公开(公告)号：CN114164229B

公开(公告)日：2023-11-03

申请号：CN202111297086.5

申请日：2021-11-04

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 顾婷婷 ,  菅宝霞 ,  李宪杨 ,  吴旭婷 ,  刘德才 ,  丁静

IPC: C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/74

Abstract: 本发明涉及一种利用FvePILS5基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体获得再生效率高的草莓新种质的方法及应用，包括：根据草莓FvePILS5的DNA序列，设计并合成包含目的基因靶点的sgRNA序列；用Bsa I酶将合成的包含目的基因靶点的sgRNA序列连接到pYLCRISPR/Cas9Pubi‑H载体；并利用农杆菌转化森林草莓叶片外植体，测序验证再生植株突变序列，得到愈伤形成和离体芽再生频率较高的pils5‑1森林草莓突变体种质。本发明通过构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，并用农杆菌转化法，获得了再生效率较高的pils5‑1突变体，创造了新种质，为草莓再生苗的获得提供了一种高效的方法。

公开(公告)号：CN114164229A

公开(公告)日：2022-03-11

申请号：CN202111297086.5

申请日：2021-11-04

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 顾婷婷 ,  菅宝霞 ,  李宪杨 ,  吴旭婷 ,  刘德才 ,  丁静

IPC: C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/74

Abstract: 本发明涉及一种利用FvePILS5基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体获得再生效率高的草莓新种质的方法及应用，包括：根据草莓FvePILS5的DNA序列，设计并合成包含目的基因靶点的sgRNA序列；用Bsa I酶将合成的包含目的基因靶点的sgRNA序列连接到pYLCRISPR/Cas9Pubi‑H载体；并利用农杆菌转化森林草莓叶片外植体，测序验证再生植株突变序列，得到愈伤形成和离体芽再生频率较高的pils5‑1森林草莓突变体种质。本发明通过构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，并用农杆菌转化法，获得了再生效率较高的pils5‑1突变体，创造了新种质，为草莓再生苗的获得提供了一种高效的方法。