公开(公告)号：CN110512027A

公开(公告)日：2019-11-29

申请号：CN201910794842.1

申请日：2019-08-27

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 粟硕 ,  张骋 ,  潘中洲 ,  贺微 ,  翟晓凤

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本申请公开了猪病毒性腹泻病病原的五重RT-PCR检测方法，其中5对引物分别为猪德尔塔冠状病毒（又名猪丁型冠状病毒）的检测引物、猪凸隆病毒的检测引物、猪流行性腹泻病毒的检测引物、猪急性腹泻综合征冠状病毒的检测引物、传染性胃肠炎病毒的检测引物。以待检样品的核酸或反转录产物作为模板，采用2×Taq Plus Master Mix，使用本申请中的5对引物对进行PCR扩增。该专利允许在一个PCR反应管中最多同时检测出5种能够导致猪群腹泻的病毒，其检测灵敏度达到初始模板浓度为每微升1×103个拷贝（1×103 copies/μL），并具有极佳的特异性和重复性，可以直接应用到临床样品检测中。

公开(公告)号：CN110512027B

公开(公告)日：2022-04-01

申请号：CN201910794842.1

申请日：2019-08-27

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 粟硕 ,  张骋 ,  潘中洲 ,  贺微 ,  翟晓凤

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本申请公开了猪病毒性腹泻病病原的五重RT‑PCR检测方法，其中5对引物分别为猪德尔塔冠状病毒（又名猪丁型冠状病毒）的检测引物、猪凸隆病毒的检测引物、猪流行性腹泻病毒的检测引物、猪急性腹泻综合征冠状病毒的检测引物、传染性胃肠炎病毒的检测引物。以待检样品的核酸或反转录产物作为模板，采用2×Taq Plus Master Mix，使用本申请中的5对引物对进行PCR扩增。该专利允许在一个PCR反应管中最多同时检测出5种能够导致猪群腹泻的病毒，其检测灵敏度达到初始模板浓度为每微升1×103个拷贝（1×103 copies/μL），并具有极佳的特异性和重复性，可以直接应用到临床样品检测中。

公开(公告)号：CN111235310A

公开(公告)日：2020-06-05

申请号：CN202010104738.8

申请日：2020-02-20

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 粟硕 ,  潘中洲 ,  陆佳萱 ,  张骋 ,  赵雯 ,  何婉婷 ,  王茹怡 ,  翟晓凤

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种猪病毒性腹泻病病原的四重Taqman荧光定量PCR检测方法（荧光定量聚合酶链式反应，qPCR，又称real-time PCR）。具体地，针对猪德尔塔冠状病毒、猪凸隆病毒、猪流行性腹泻病毒和猪急性腹泻综合征冠状病毒，设计了四对特异性引物和TaqMan探针，实现了在一个PCR反应管中同时检测四种能够引起猪群腹泻的病毒，且其检测灵敏度达到初始模板浓度为每微升1×102个拷贝（1×102 copies·μL-1），并具有极佳的特异性和重复性，可以直接应用到临床样品检测中。