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公开(公告)号：CN118086354A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410048748.2
申请日：2024-01-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/81 , A61K38/47 , A61P1/00 , A61P31/04 , C12N15/65 , C12N15/63 , C12N9/36 , C07K19/00 , A23K20/189 , C12R1/865
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种表达人溶菌酶的布拉迪酵母系统及其构建方法与应用，本发明首次通过将融合了鸡溶菌酶信号肽的hLYZ基因转入益生菌S.bΔCUP1ΔURA3中，构建得到工程酵母S.bΔCUP1ΔURA3/pCUP1‑cf‑hLYZ，该工程酵母可分泌表达具有抑菌活性的hLYZ。通过小鼠灌胃试验可见，该工程酵母能在小鼠肠道原位环境中通过Cu2+诱导表达hLYZ，且在肠道中展现出一定的功能活性。
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公开(公告)号：CN117947078A
公开(公告)日：2024-04-30
申请号：CN202410048747.8
申请日：2024-01-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/81 , C12N15/63 , C12N1/19 , C12N15/65 , C07K14/08 , C07K19/00 , A61K39/12 , A61P31/14 , A61P37/04 , C12R1/865
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种肠道原位诱导表达PCV2Cap蛋白的布拉迪酵母系统及其构建方法与应用，本发明首次通过将融合了α因子信号肽的PCV2Cap基因序列转入益生菌S.bΔCUP1ΔURA3中，构建得到工程S.bΔCUP1ΔURA3/pCUP1‑αf‑PCV2Cap，该工程酵母可分泌表达PCV2Cap蛋白。通过小鼠灌胃试验可见，该工程酵母能在小鼠肠道原位环境中通过Cu2+诱导表达PCV2Cap蛋白，且具有一定的免疫原性，能分别诱导产生Th1型和Th2型免疫应答。
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公开(公告)号：CN110591969A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910953404.5
申请日：2019-10-09
Applicant: 华南农业大学 , 广州沃德生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种高产γ-氨基丁酸的解淀粉芽孢杆菌，是通过从地表下6cm附近的土壤中筛选得到。本发明还公开了利用所述解淀粉芽孢杆菌生产γ-氨基丁酸的方法，包括以下步骤：(1)将所述解淀粉芽孢杆菌于牛肉膏蛋白胨培养基液体内进行种子液培养；(2)将步骤(1)获得的种子液接种于发酵培养基内进行发酵培养；(3)用Berthelot比色法对步骤(2)获得的发酵液上清进行定性检测；(4)RP-HPLC纯化步骤(3)中的发酵液。本发明提供了一种高产γ-氨基丁酸的解淀粉芽孢杆菌，能高产GABA，菌株抗逆性较强，菌种生活力维持时间长等优点，可长久保藏。同时建立了Berthelot比色法和RP-HPLC法对γ-氨基丁酸进行快速地测定和纯化制备。
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公开(公告)号：CN102127533A
公开(公告)日：2011-07-20
申请号：CN201010618223.6
申请日：2010-12-31
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组猪圆环病毒2型Cap抗原的制备方法，是采用酵母表达系统，先扩增PCV2-ORF2基因，然后构建表达工程菌，即将扩增序列插入酵母表达载体，形成重组表达载体，线性化后转化毕赤酵母宿主细胞，构建表达工程菌，最后重组酵母菌分泌表达，得到重组猪圆环病毒2型Cap抗原蛋白。酵母表达系统对表达的蛋白有加工折叠和翻译后修饰的功能，从而使表达的蛋白具有生物活性，比起大肠杆菌更有优势，但比哺乳动物细胞表达系统操作更简便。而与酿酒酵母相比，毕赤酵母不易过度糖基化，因此分离纯化步骤简单。采用酵母表达系统操作简单、表达量较高，生产成本低，可以进行大规模生产，有利于猪圆环病毒亚单位疫苗的推广使用。
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公开(公告)号：CN101870986A
公开(公告)日：2010-10-27
申请号：CN201010181259.2
申请日：2010-05-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种抗菌肽plectasin的高效生产方法及应用，通过构建pGAPZαA-plectasin真核表达载体转化宿主细胞毕赤酵母，构建表达工程菌，发酵培养表达工程菌后将表达培养基离心处理得到上清液即为纯化得到抗菌肽plectasin。所述抗菌肽plectasin可应用于制备抗菌药物或饲料添加剂或防腐剂，对金黄色葡萄球菌或猪源链球菌具有良好的抗性作用。本发明操作简单，成本较低。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103585625A
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201310620396.5
申请日：2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/215 , C12N15/50 , C12N15/86 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物疫苗制备技术领域，具体涉及一种猪流行性腹泻重组杆状病毒基因工程亚单位疫苗及其制备方法与应用。本发明选取当前PEDV新流行毒株的S1基因和M基因为参考序列，采用杆状病毒表达系统表达S1蛋白或部分S1蛋白和M蛋白，将获得的重组蛋白制备成亚单位疫苗，用于有效控制猪流行性腹泻的发生。本发明所述方法制得的猪流行性腹泻基因工程亚单位疫苗解决了目前猪流行性腹泻病毒传统疫苗存在的缺陷，可用于预防和治疗猪流行性腹泻病毒感染及其引起的相关疾病，也同样适用于制备检测猪流行性腹泻病毒抗体ELISA试剂盒的包被抗原。
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公开(公告)号：CN102229934A
公开(公告)日：2011-11-02
申请号：CN201110158765.4
申请日：2011-06-14
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪小肠抗菌肽PR-39在毕赤酵母中的高效生产方法及应用。本发明根据毕赤酵母的偏嗜性合成编码PR-39的DNA序列，连接表达载体pGAPZαA，构建pGAPZαA-PR-39真核表达载体；转化重组表达载体至宿主细胞，构建表达工程菌；发酵培养重组酵母菌，进行表达。本发明应用基因工程技术在毕赤酵母宿主细胞中高效表达了抗菌肽PR-39，表达效率高，分离纯化简单，生产成本低，易放大，稳定性好，适于大规模工业化生产，在制备抗菌药物、饲料添加剂或食品防腐剂方面具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN112063644A
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN202010957447.3
申请日：2020-09-13
Applicant: 华南农业大学 , 广东中山市茂辉生物科技有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域，尤指一种环二肽合成酶的高效原核表达载体及其应用，表达载体由环二肽合成酶的基因与Pet28a(+)载体连接构成，其构建方法包括：1)选择环二肽合成酶的基因片段进行合成；2)环二肽合成酶基因与Pet28a(+)载体进行连接；3)连接产物转化入DH5a感受态细胞中；4)鉴定为阳性的菌落在含Amp的液体LB培养基中培养后提质粒；5)将提取的质粒转化入大肠杆菌感受态BL21中；本发明利用Pet28a(+)载体，构建出一种高效的环二肽合成酶表达载体，利用IPTG诱导获得高浓度的环二肽合成酶合成具有生物活性的环二肽，实现简化操作程序的效果，并解决环二肽的工业化生产成本高和收集工序昂贵和复杂等问题。
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公开(公告)号：CN111575250A
公开(公告)日：2020-08-25
申请号：CN202010389363.4
申请日：2020-05-10
Applicant: 华南农业大学 , 广东中山市茂辉生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及一种分子生物学领域，尤指一种Butelase1酶的提取方法及其环化多肽的环化方法，提取方法包括：1)采集蝶豆花和叶子加入EB1缓冲液，打碎后得混合匀浆；2)将混合匀浆离心后取上清液，并过滤除杂；3)继续加入固体硫酸铵盐，置于室温培育，离心除去沉淀杂蛋白，获得沉淀与上清液；4)往上清液中加入固体硫酸铵盐，置于室温培育，离心弃上清液，获得蛋白质沉淀与上清液；5)采用EB1缓冲液重悬沉淀蛋白质，采用EB2缓冲液过夜透析，获得透析液；6)将透析液离心并弃沉淀，保留上清液；7)取上清液至超滤管中，取截留液进行环化反应；本发明通过提取与环化过程使Butelase 1环化产生抑菌活性，整体操作过程方便高效，易于工业化生产。
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公开(公告)号：CN103585625B
公开(公告)日：2015-12-02
申请号：CN201310620396.5
申请日：2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/215 , C12N15/50 , C12N15/86 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物疫苗制备技术领域，具体涉及一种猪流行性腹泻重组杆状病毒基因工程亚单位疫苗及其制备方法与应用。本发明选取当前PEDV新流行毒株的S1基因和M基因为参考序列，采用杆状病毒表达系统表达S1蛋白或部分S1蛋白和M蛋白，将获得的重组蛋白制备成亚单位疫苗，用于有效控制猪流行性腹泻的发生。本发明所述方法制得的猪流行性腹泻基因工程亚单位疫苗解决了目前猪流行性腹泻病毒传统疫苗存在的缺陷，可用于预防和治疗猪流行性腹泻病毒感染及其引起的相关疾病，也同样适用于制备检测猪流行性腹泻病毒抗体ELISA试剂盒的包被抗原。
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