一种稻瘟菌分泌蛋白的提取方法及应用shotgun技术研究其分泌蛋白质组的方法

    公开(公告)号:CN109536432A

    公开(公告)日:2019-03-29

    申请号:CN201811162769.8

    申请日:2018-09-30

    Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌分泌蛋白的提取方法及应用shotgun技术研究其分泌蛋白质组的方法,包括以下步骤:S1.稻瘟菌分生孢子的培养:将稻瘟菌菌丝接种至PDA培养基中进行培养;向培养基中加入无菌水,捣碎菌丝,转至西红柿燕麦培养基中,涂抹均匀,28℃下光照培养2~4d;将培养基表面菌丝打断,再加入无菌水,洗去培养基表面菌丝,28℃下光照培养2~4d进行产孢;加入无菌水进行冲洗,收集分生孢子,过滤后得到浓缩的稻瘟菌分生孢子悬浮液;S2.采用超滤法制备稻瘟菌分生孢子分泌蛋白。本发明通过优化稻瘟菌分生孢子的培养和分泌蛋白的诱导提取步骤,避免了复杂的样品前处理过程;并应用shotgun技术,高通量分析鉴定了稻瘟菌分泌蛋白;本发明对于探究稻瘟菌的致病机理有重要意义。

    一种稻瘟菌分泌蛋白的提取方法及应用shotgun技术研究其分泌蛋白质组的方法

    公开(公告)号:CN109536432B

    公开(公告)日:2022-05-31

    申请号:CN201811162769.8

    申请日:2018-09-30

    Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌分泌蛋白的提取方法及应用shotgun技术研究其分泌蛋白质组的方法,包括以下步骤:S1.稻瘟菌分生孢子的培养:将稻瘟菌菌丝接种至PDA培养基中进行培养;向培养基中加入无菌水,捣碎菌丝,转至西红柿燕麦培养基中,涂抹均匀,28℃下光照培养2~4d;将培养基表面菌丝打断,再加入无菌水,洗去培养基表面菌丝,28℃下光照培养2~4d进行产孢;加入无菌水进行冲洗,收集分生孢子,过滤后得到浓缩的稻瘟菌分生孢子悬浮液;S2.采用超滤法制备稻瘟菌分生孢子分泌蛋白。本发明通过优化稻瘟菌分生孢子的培养和分泌蛋白的诱导提取步骤,避免了复杂的样品前处理过程;并应用shotgun技术,高通量分析鉴定了稻瘟菌分泌蛋白;本发明对于探究稻瘟菌的致病机理有重要意义。

    MODIP基因在调控稻瘟菌生长发育与产孢中的应用

    公开(公告)号:CN112094852B

    公开(公告)日:2022-04-01

    申请号:CN202010935214.3

    申请日:2018-09-21

    Abstract: 本发明公开了MODIP基因在调控稻瘟菌生长发育与产孢中的应用。稻瘟菌MODIP基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第127‑2547位所示,编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。稻瘟菌MODIP基因可用于调控稻瘟菌菌丝生长、分生孢子的产生以及对水稻的致病性。实验证明,稻瘟菌MODIP基因被潮霉素磷酸转移酶基因(hph)和荧光蛋白基因(SGFP)置换后,所得到的稻瘟菌敲除突变体的菌丝生长速度和产孢量明显低于于野生型稻瘟菌;致病性实验表明,稻瘟菌敲除突变体在水稻叶片上不能形成明显病斑;MODIP基因的缺失可导致稻瘟菌对水稻侵染能力的下降。本发明所提供的MODIP基因及其应用在稻瘟病的防控方面具有重要意义。

    MODIP基因在调控稻瘟菌生长发育与产孢中的应用

    公开(公告)号:CN112094852A

    公开(公告)日:2020-12-18

    申请号:CN202010935214.3

    申请日:2018-09-21

    Abstract: 本发明公开了MODIP基因在调控稻瘟菌生长发育与产孢中的应用。稻瘟菌MODIP基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第127‑2547位所示,编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。稻瘟菌MODIP基因可用于调控稻瘟菌菌丝生长、分生孢子的产生以及对水稻的致病性。实验证明,稻瘟菌MODIP基因被潮霉素磷酸转移酶基因(hph)和荧光蛋白基因(SGFP)置换后,所得到的稻瘟菌敲除突变体的菌丝生长速度和产孢量明显低于于野生型稻瘟菌;致病性实验表明,稻瘟菌敲除突变体在水稻叶片上不能形成明显病斑;MODIP基因的缺失可导致稻瘟菌对水稻侵染能力的下降。本发明所提供的MODIP基因及其应用在稻瘟病的防控方面具有重要意义。

    一种稻瘟菌基因Movan及其应用

    公开(公告)号:CN109371044A

    公开(公告)日:2019-02-22

    申请号:CN201811269864.8

    申请日:2018-10-29

    Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌基因Movan及其应用。本发明研究克隆得到稻瘟菌致病相关基因,并实验证明,将该基因从稻瘟菌中成功敲除后,所得到的稻瘟菌敲除突变体的菌落生长速度缓慢,气生菌丝较稀疏,菌落颜色呈现灰白色,黑色素沉积明显低于野生型稻瘟菌;此外,突变体的产孢量明显低于野生型稻瘟菌。致病性实验表明,稻瘟菌敲除突变体在水稻叶片上不能形成明显病斑;基因Movan的缺失可导致稻瘟菌对水稻侵染能力的下降。本发明所提供的方法和应用在稻瘟病的防控方面具有重要意义。

    一种稻瘟菌基因Movan及其应用

    公开(公告)号:CN109371044B

    公开(公告)日:2021-03-12

    申请号:CN201811269864.8

    申请日:2018-10-29

    Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌基因Movan及其应用。本发明研究克隆得到稻瘟菌致病相关基因,并实验证明,将该基因从稻瘟菌中成功敲除后,所得到的稻瘟菌敲除突变体的菌落生长速度缓慢,气生菌丝较稀疏,菌落颜色呈现灰白色,黑色素沉积明显低于野生型稻瘟菌;此外,突变体的产孢量明显低于野生型稻瘟菌。致病性实验表明,稻瘟菌敲除突变体在水稻叶片上不能形成明显病斑;基因Movan的缺失可导致稻瘟菌对水稻侵染能力的下降。本发明所提供的方法和应用在稻瘟病的防控方面具有重要意义。

    一种稻瘟菌MODIP基因及其应用

    公开(公告)号:CN109337916B

    公开(公告)日:2020-12-04

    申请号:CN201811117896.6

    申请日:2018-09-21

    Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌MODIP基因及其应用。稻瘟菌MODIP基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第127‑2547位所示,编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。稻瘟菌MODIP基因可用于调控稻瘟菌菌丝生长、分生孢子的产生以及对水稻的致病性。实验证明,稻瘟菌MODIP基因被潮霉素磷酸转移酶基因(hph)和荧光蛋白基因(SGFP)置换后,所得到的稻瘟菌敲除突变体的菌丝生长速度和产孢量明显低于于野生型稻瘟菌;致病性实验表明,稻瘟菌敲除突变体在水稻叶片上不能形成明显病斑;MODIP基因的缺失可导致稻瘟菌对水稻侵染能力的下降。本发明所提供的MODIP基因及其应用在稻瘟病的防控方面具有重要意义。

    一种稻瘟菌MODIP基因及其应用

    公开(公告)号:CN109337916A

    公开(公告)日:2019-02-15

    申请号:CN201811117896.6

    申请日:2018-09-21

    Abstract: 本发明公开了一种稻瘟菌MODIP基因及其应用。稻瘟菌MODIP基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1的第127-2547位所示,编码的蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。稻瘟菌MODIP基因可用于调控稻瘟菌菌丝生长、分生孢子的产生以及对水稻的致病性。实验证明,稻瘟菌MODIP基因被潮霉素磷酸转移酶基因(hph)和荧光蛋白基因(SGFP)置换后,所得到的稻瘟菌敲除突变体的菌丝生长速度和产孢量明显低于于野生型稻瘟菌;致病性实验表明,稻瘟菌敲除突变体在水稻叶片上不能形成明显病斑;MODIP基因的缺失可导致稻瘟菌对水稻侵染能力的下降。本发明所提供的MODIP基因及其应用在稻瘟病的防控方面具有重要意义。

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