公开(公告)号：CN113481280A

公开(公告)日：2021-10-08

申请号：CN202110282855.8

申请日：2021-03-16

Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院

Inventor： 汪宏波 ,  章伟 ,  舒湾 ,  赵蓉

IPC: C12Q1/6827 ,  C12Q1/682

Abstract: 本发明公开了一种快速通用的低丰度突变检测方法。它包括如下步骤，步骤一：制备单脱碱基的双标记荧光探针；步骤二：设计所需的突变链，野生链，引导链，桥梁链和阻遏链；步骤三：配置液体；步骤四：制备浓度为500nm混合样本；步骤五：加入阻遏链；步骤六：将引导链和桥梁链混合配置成混合液；步骤七：将混合液静置；步骤八：将步骤四配置的混合液分别加入到步骤七处理的混合液，配置成混合液；步骤九：在步骤七的混合液中加入步骤一制得的探针；步骤十：在步骤八的混合液中加入酶；步骤十一：将步骤九的液体加入到检测管中检测荧光曲线；步骤十二：得到突变点的荧光曲线。本发明具有能高选择性、快速、低成本地检测目标DNA序列的优点。

公开(公告)号：CN115997727B

公开(公告)日：2025-04-29

申请号：CN202211466437.5

申请日：2022-11-22

Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院

Inventor： 汪宏波 ,  赵蓉 ,  章伟 ,  舒湾 ,  张俊

IPC: A01K67/0276 ,  A61K49/00

Abstract: 本发明属于动物模型构建技术领域，尤其涉及一种自发性子宫内膜癌小鼠模型的构建方法及其应用。所述构建方法包括通过Cre/loxP系统，构建基因型为Cre；PTENflox/‑；STK11flox/flox的小鼠模型，该小鼠模型在激活子宫上皮细胞Cre重组酶的表达后，选择性敲除PTEN基因和STK11基因，自发性诱发子宫内膜癌的发生。本发明通过选择性缺失子宫上皮细胞的PTEN基因和STK11基因，使子宫病理迅速改变，具有成瘤时间短、成瘤率高的优点，而且，由于采用原位成瘤技术，本发明的小鼠模型可模拟人体子宫内膜癌的生长环境，肿瘤组织学特性与人子宫内膜癌极为接近，符合人体子宫内膜癌的生物学特点。

公开(公告)号：CN115997727A

公开(公告)日：2023-04-25

申请号：CN202211466437.5

申请日：2022-11-22

Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院

Inventor： 汪宏波 ,  赵蓉 ,  章伟 ,  舒湾 ,  张俊

IPC: A01K67/027 ,  A61K49/00

Abstract: 本发明属于动物模型构建技术领域，尤其涉及一种自发性子宫内膜癌小鼠模型的构建方法及其应用。所述构建方法包括通过Cre/loxP系统，构建基因型为Cre；PTENflox/‑；STK11flox/flox的小鼠模型，该小鼠模型在激活子宫上皮细胞Cre重组酶的表达后，选择性敲除PTEN基因和STK11基因，自发性诱发子宫内膜癌的发生。本发明通过选择性缺失子宫上皮细胞的PTEN基因和STK11基因，使子宫病理迅速改变，具有成瘤时间短、成瘤率高的优点，而且，由于采用原位成瘤技术，本发明的小鼠模型可模拟人体子宫内膜癌的生长环境，肿瘤组织学特性与人子宫内膜癌极为接近，符合人体子宫内膜癌的生物学特点。

公开(公告)号：CN115058496A

公开(公告)日：2022-09-16

申请号：CN202210518320.0

申请日：2022-05-12

Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院

Inventor： 汪宏波 ,  章伟 ,  董科均 ,  张家瑞 ,  舒湾

IPC: C12Q1/6858

Abstract: 本发明公开了一种快速低丰度检测插入和缺失突变的方法。它步骤一：制备双标记荧光探针；步骤二：制备核酸酶；步骤三：设计所需的突变链，野生链，gRNA；步骤四：配置野生链和突变链的双链DNA液体；步骤五：配制混合反应液；步骤六：将步骤四中的液体配制成双链的野生链和突变链；步骤七：配制待检反应体系：步骤八：检测荧光曲线；步骤九：野生链稀释突变链；步骤十：配制待检反应体系；步骤十一：检测荧光曲线；步骤十二：设计RPA反应的引物；步骤十三：稀释合成的链粉末；步骤十四：配置RPA反应体系；步骤十五：配制50ul的待检反应体系；步骤十六：检测荧光曲线。本发明具有成本低，检测速度快，灵敏度高的优点。

公开(公告)号：CN113481280B

公开(公告)日：2022-06-07

申请号：CN202110282855.8

申请日：2021-03-16

Applicant: 华中科技大学同济医学院附属协和医院

Inventor： 汪宏波 ,  章伟 ,  舒湾 ,  赵蓉

IPC: C12Q1/6827 ,  C12Q1/682

Abstract: 本发明公开了一种快速通用的低丰度突变检测方法。它包括如下步骤，步骤一：制备单脱碱基的双标记荧光探针；步骤二：设计所需的突变链，野生链，引导链，桥梁链和阻遏链；步骤三：配置液体；步骤四：制备浓度为500nm混合样本；步骤五：加入阻遏链；步骤六：将引导链和桥梁链混合配置成混合液；步骤七：将混合液静置；步骤八：将步骤四配置的混合液分别加入到步骤七处理的混合液，配置成混合液；步骤九：在步骤七的混合液中加入步骤一制得的探针；步骤十：在步骤八的混合液中加入酶；步骤十一：将步骤九的液体加入到检测管中检测荧光曲线；步骤十二：得到突变点的荧光曲线。本发明具有能高选择性、快速、低成本地检测目标DNA序列的优点。