公开(公告)号：CN119639740A

公开(公告)日：2025-03-18

申请号：CN202411517780.7

申请日：2024-10-29

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 陆海 ,  冯玉萍 ,  郭雪琴 ,  张慧敏 ,  冯雨倩 ,  刘涵 ,  刘迪 ,  李慧

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  C12N15/66 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明提供了一种sgRNA、CRISPR/Cas9载体及其构建方法和在杨树基因编辑中的应用，涉及植物基因工程技术领域。本发明通过优化sgRNA长度和重复数量获得特定的sgRNA，基于所述的sgRNA构建获得CRISPR/Cas9系统，该CRISPR/Cas9系统能够显著提高杨树内源基因PagRbcS和PagHEMA的编辑效率，尤其提高杨树内源基因的单等位基因和双等位基因的编辑效率。

公开(公告)号：CN119639719A

公开(公告)日：2025-03-18

申请号：CN202411517675.3

申请日：2024-10-29

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 陆海 ,  刘涵 ,  张梦雨 ,  冯玉萍 ,  刘迪 ,  李慧

IPC: C12N9/22 ,  C12N9/78 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/00

Abstract: 本发明提供了一种植物胞嘧啶单碱基编辑器及其构建方法和应用，涉及植物基因工程技术领域。本发明所述的单碱基编辑器命名为hyPopCBE，该编辑器包含hA3A/Y130F胞嘧啶脱氨酶、优化后的人源Rab51单链DNA结合蛋白结构域、nCas9核酸酶和尿嘧啶糖基化酶抑制剂的融合蛋白、噬菌体MS2外壳蛋白和尿嘧啶糖基化酶抑制剂的融合蛋白表达单元以及整合了MS2结合序列的向导RNA转录表达单元。相比现有植物胞嘧啶单碱基编辑器，本发明构建的单碱基编辑器能够显著提高植物等位基因的编辑效率，稳定性更强；将其应用于杨树中，能够成功创制出抗除草剂杨树新种质，为杨树功能基因组的研究和分子育种提供了技术支持。