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公开(公告)号：CN117476100A
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311457621.8
申请日：2023-11-03
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G16B20/10
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，公开一种DNA拷贝数含量与质量浓度间量值转换方法，包括：选取所述样本DNA中的内标基因DNA，获取所述内标基因DNA的拷贝数浓度值C1；获取内标基因在样本单倍体基因组中的位点数r；获取所述样本基因组的碱基对数E；获取DNA碱基的平均分子量w；通过所述拷贝数浓度值C1、所述内标基因在样本单倍体基因组中的位点数r、所述碱基对数E和DNA碱基的平均分子量w对所述样本DNA的质量浓度C进行计算；本发明建立了DNA拷贝数含量(copies/μl)精确转换为质量分数(ng/μl)的方法，尤其对转换过引入的不确定度分量进行了有效准确的评估，使经过转换后的标准物质质量分数量值可溯源至国际单位制(g)，从而保证了标准物质量值转换后的计量溯源性。
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公开(公告)号：CN118956578A
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202411196047.X
申请日：2024-08-29
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明提供了一种数字PCR系统及其使用方法，其中系统包括混合微流控芯片、微腔阵列微流控芯片、PCR设备、读取仪；通过混合微流控芯片制备磁珠悬浮液，通过微腔阵列微流控芯片中的微腔固定磁珠悬浮液；PCR用于对磁珠悬浮液进行扩增；读取仪用于对微腔阵列微流控芯片进行读取，获取读取结果。本发明使用磁珠吸附核酸，利用微腔阵列固定磁珠，并且对微腔阵列的尺寸进行合理设置，使得每个微腔仅能容纳一个磁珠，进一步加强了磁珠的固定效果，同时避免了团聚现象。
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公开(公告)号：CN119685454A
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202411919683.0
申请日：2024-12-24
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: C12Q1/6844
Abstract: 本发明提供了一种基于滚环扩增技术的流式核酸单分子计数方法，属于DNA检测技术领域。本发明所述的基于滚环扩增技术的流式核酸单分子计数方法包括以下步骤：DNA样本制备，得到待测DNA样本；基于所述DNA样本，设计引物探针，所述引物探针包括锁环探针、扩增引物和荧光探针；基于所述引物探针进行滚环扩增反应即RCA反应，得到滚环扩增产物：将所述滚环扩增产物导入流式单分子计数仪中进行流式计数，得到所述DNA样本的原始浓度。本发明巧妙地将滚环扩增即RCA等温扩增与单分子计数技术相结合，实现了对核酸单分子特定序列的高精度检测和定量，这一组合大大提升了核酸检测的敏感性、特异性和准确性。
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公开(公告)号：CN119438455A
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202411827453.1
申请日：2024-12-12
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明涉及生物检测技术领域，尤其为一种免消解的等离子体质谱片段DNA含量检测方法，包括以下步骤：S1，DNA样品纯化：使用截留分子量为3KDa的离心管，去除单核苷酸及少于10个碱基的小片段核酸；并对凝胶电泳纯化后的DNA样品进行截留处理，通过多次浓缩与补水实现纯化；S2，液相色谱与质谱条件设定：液相色谱流动相为10mM TRIS‑HCL，以及1mM EDTA，pH设定范围7‑7.5，使用氨水调节pH，最终优化条件为7.3；采用分子量截留法结合尺寸排阻色谱偶联电感耦合等离子体质谱的方法，获得纯度更高的DNA片段，用于候选标准物质DNA。经过纯化的高纯度DNA片段，使用无机磷元素标准曲线进行含量测定，获得片段质量浓度信息。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116790584A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310817917.X
申请日：2023-07-05
Applicant: 中国计量科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种等温聚合酶链反应分析仪校准试剂盒及其应用，属于基因工程技术领域。该试剂盒包括标准物质、扩增引物组、反应缓冲液、聚合酶、染料以及阴性对照；其中所述标准物质为质粒DNA，梯度浓度水平为100‑106copies/μL，所述扩增引物组的核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑6所示，所述聚合酶为BstDNA聚合酶，所述染料为LAMP荧光染料(激发：485nm,发射：498nm,检测通道为#imgabs0#GreenI或FAM通道)。本发明提供的等温PCR仪校准用试剂盒和校准技术满足了等温PCR仪的校准需求，填补了技术空白。
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公开(公告)号：CN119000488A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411077958.0
申请日：2024-08-07
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G01N15/1434 , G01N21/01 , G01N21/64
Abstract: 本发明涉及计量领域，尤其涉及一种同轴聚焦微纳芯片及其使用方法，其结构包括外管、内管、第一进样储液池和第二进样储液池；外管固定在玻璃片的一面上，外管的一端连接有Y型三通接头，另一端设置有废液收集池；内管从Y型三通接头的一侧支口插入并延伸至外管中；第一进样储液池通过管道与内管连通；第二进样储液池通过管道与Y型三通接头的另一侧支口。本发明芯片制造流程更简化、成本低、聚焦效果优异，且可与高倍物镜(如100X油镜)兼容，可用于对纳米荧光球、DNA样本的流式计数检测。
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公开(公告)号：CN117802267B
公开(公告)日：2024-09-13
申请号：CN202410231453.9
申请日：2024-03-01
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明提供了烟草疫霉菌的定量检测方法及其增殖预测系统，所述方法包括：采用所述的ITS上引物、ITS下引物和荧光探针配置反应体系进行微滴式数字PCR扩增，获得烟草疫霉菌DNA样本的ITS片段拷贝数浓度x，乘以提取的DNA样本体积得到该样本的总拷贝数（copies），除以相应样本称量质量g，即得到单位质量下的烟草疫霉菌含量，即copies/g。并基于实际侵染样本的定量结果建立了科学预测烟草疫霉菌增殖规律的数学模型，为该真菌的准确鉴定、定量，以及对烟草黑胫病的有效防控提供技术支撑。
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公开(公告)号：CN117476100B
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202311457621.8
申请日：2023-11-03
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: G16B20/10
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，公开一种DNA拷贝数含量与质量浓度间量值转换方法，包括：选取所述样本DNA中的内标基因DNA，获取所述内标基因DNA的拷贝数浓度值C1；获取内标基因在样本单倍体基因组中的位点数r；获取所述样本基因组的碱基对数E；获取DNA碱基的平均分子量w；通过所述拷贝数浓度值C1、所述内标基因在样本单倍体基因组中的位点数r、所述碱基对数E和DNA碱基的平均分子量w对所述样本DNA的质量浓度C进行计算；本发明建立了DNA拷贝数含量(copies/μl)精确转换为质量分数(ng/μl)的方法，尤其对转换过引入的不确定度分量进行了有效准确的评估，使经过转换后的标准物质质量分数量值可溯源至国际单位制(g)，从而保证了标准物质量值转换后的计量溯源性。
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公开(公告)号：CN117802267A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202410231453.9
申请日：2024-03-01
Applicant: 中国计量科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明提供了烟草疫霉菌的定量检测方法及其增殖预测系统，所述方法包括：采用所述的ITS上引物、ITS下引物和荧光探针配置反应体系进行微滴式数字PCR扩增，获得烟草疫霉菌DNA样本的ITS片段拷贝数浓度x，乘以提取的DNA样本体积得到该样本的总拷贝数（copies），除以相应样本称量质量g，即得到单位质量下的烟草疫霉菌含量，即copies/g。并基于实际侵染样本的定量结果建立了科学预测烟草疫霉菌增殖规律的数学模型，为该真菌的准确鉴定、定量，以及对烟草黑胫病的有效防控提供技术支撑。
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