一种Ilyonectria robusta真菌原生质体的制备方法及遗传转化体系的构建方法

    公开(公告)号:CN119552753A

    公开(公告)日:2025-03-04

    申请号:CN202411913127.2

    申请日:2024-12-24

    Abstract: 本发明涉及微生物遗传转化领域,公开了一种Ilyonectria robusta真菌原生质体的制备方法及遗传转化体系的构建方法,该制备方法,包括如下步骤:S11、制备I.robusta菌丝,将I.robusta在PDA固体培养基上培养14d后,接种至CMC液体培养基摇瓶培养,过滤收集孢子;稀释孢子浓度并接种至YEPD液体培养基中摇瓶培养,过滤收集菌丝;S12、配置酶解液S12、制备I.robusta原生质体,将步骤S11制备的菌丝加至S12、配置酶解液中摇瓶酶解,过滤,滤液离心弃上清液后,加入0.7M NaCl溶液离心,弃上清液,获得I.robusta真菌原生质体。本发明可高效获得数量适宜、质量好的原生质体,提高后续遗传转化体系的转化效率;且构建的遗传转化体系可用于I.robusta菌株突变体库的构建、寄主植物与I.robusta互作和I.robusta菌株致病机理研究。

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