公开(公告)号：CN119372234A

公开(公告)日：2025-01-28

申请号：CN202411503005.6

申请日：2024-10-25

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 吴森 ,  李攀 ,  杜旭光 ,  董鼎才 ,  高菲 ,  谢宇洋 ,  黄泓林 ,  孙思维 ,  马昭 ,  何诚 ,  赖锦盛

IPC: C12N15/74 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N1/21 ,  C12N15/12 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种基于脱硫弧菌I‑C型CRISPR基因编辑系统及其应用，属于基因编辑技术领域。上述基因编辑系统包括CRISPR RNA(crRNA)piggyBac(PB)载体、I‑C型编辑器piggyBac载体以及piggyBac(PB)转座酶表达载体；I‑C型编辑器piggyBac载体包括两端的PB接头序列、Cascade组件、Cas3蛋白及Puro抗性基因，所述Cascade组件由Cas5c蛋白、Cas7c蛋白、Cas8c蛋白和Cas11c蛋白复合而成，通过不同的2A肽连接，受同一CMV启动子调控。本发明所得基因编辑系统在哺乳动物细胞和动物中能够进行精确高效基因组编辑和碱基编辑，利用优化的该编辑器和成对的PAM内向crRNAs，在人类和猪细胞系的多个内源位点实现了定义性的缺失，此外，结合外源同源臂供体载体，也可以实现大的基因片段的精确替换。

公开(公告)号：CN120060241A

公开(公告)日：2025-05-30

申请号：CN202510270599.9

申请日：2025-03-07

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 杜旭光 ,  吴森 ,  何志勇 ,  谢宇洋

IPC: C12N15/10 ,  C12N15/55 ,  C12N15/56

Abstract: 本发明公开了一种同时实现嘌呤和嘧啶替换的碱基编辑器ACGBEmax，涉及基因编辑技术领域，该碱基编辑器ACGBEmax从N端到C端依次包括HMCES蛋白、双功能脱氨酶TadDual、nCas9(D10A)蛋白和工程化的N‑甲基嘌呤DNA糖基化酶eMPG。该碱基编辑器能够同时实现嘌呤和嘧啶替换，显著增加了靶向编辑后突变体的多样性，并具有编辑效率高和Indels率较低的优点，在体内外蛋白突变筛选和致癌氨基酸突变鉴定等方面有较大的应用价值。

公开(公告)号：CN118853671A

公开(公告)日：2024-10-29

申请号：CN202410860562.7

申请日：2024-06-28

Applicant: 中国农业大学

Inventor： 吴森 ,  李攀 ,  杜旭光 ,  董鼎才 ,  高菲 ,  谢宇洋 ,  黄泓林 ,  孙思维 ,  马昭 ,  何诚 ,  赖锦盛

IPC: C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开了一种基于脱硫弧菌I‑C型CRISPR基因编辑系统及其应用，属于基因编辑技术领域。上述基因编辑系统包括CRISPR RNA、I‑C型编辑器piggyBac载体和DNA剪切模块；I‑C型编辑器piggyBac载体包括Cascade组件、Cas3蛋白及Puro抗性基因所述Cascade组件由Cas5c蛋白、Cas7c蛋白、Cas8c蛋白和Cas11c蛋白复合而成，通过不同的2A肽连接，受同一CMV启动子调控。本发明所得基因编辑系统在哺乳动物细胞和动物中能够进行精确高效基因组编辑和碱基编辑。利用优化的编辑器和成对的PAM内向crRNAs，在人类和猪细胞系的多个内源位点实现了定义性的缺失。