公开(公告)号：CN113862301A

公开(公告)日：2021-12-31

申请号：CN202110982954.7

申请日：2021-08-25

Applicant: 上海交通大学医学院附属瑞金医院

Inventor： 王学锋 ,  周爱武 ,  梁茜 ,  武文漫

IPC: C12N15/86 ,  C12N15/867 ,  C12N15/861 ,  C12N15/864 ,  C12N15/12 ,  A61K48/00 ,  A61K38/37 ,  A61P7/04

Abstract: 本发明涉及一种VWF前肽表达载体及其制备方法和应用，包括VWF信号肽和VWF结构域D1D2区的编码序列以及终止密码子。基于VWF前肽参与VWF多聚体组装的作用机制，本发明的VWF前肽表达载体可以仅仅通过引入正常的VWF前肽，恢复部分先天性VWF多聚体形成障碍，为通过“蛋白质结构编辑”在蛋白水平上纠正先天性缺陷的基因治疗策略铺平了道路。

公开(公告)号：CN106754842A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201710047107.5

申请日：2017-01-20

Applicant: 上海交通大学医学院

Inventor： 周爱武 ,  张飞

IPC: C12N9/76 ,  C12N15/70

CPC classification number: C12N9/6427 ,  C12N15/70 ,  C12Y304/21004

Abstract: 本发明公开了一种胰蛋白酶制备方法，即利用Psumo3‑AMP载体将Sumo3标签蛋白第92位甘氨酸后连接胰蛋白酶的第24位异亮氨酸，过表达胰蛋白酶融合蛋白形成包涵体，然后将包涵体清洗、溶解和复性，最后将胰蛋白酶激活和纯化。本发明的优点在于：(1)利用基因工程原理，利用大肠杆菌表达重组的胰蛋白酶，原料来源明确，蛋白质量可控；(2)采用Sumo3融合蛋白形式，经特异性高的Sumo特异性蛋白酶2(SENP2)切除Sumo3标签得到有生物活性的胰蛋白酶，本方法中胰蛋白酶的激活速率可控，折叠效率高且所得蛋白均一性好。