本发明属于基因分型检测方法技术领域，具体涉及一种用于基于NGS技术的ABO基因全长序列测定方法。本发明还涉及一种基于NGS技术的ABO基因全长序列测定方法所用试剂。本发明所提供的方法对ABO基因全长序列包括5’UTR部分区域、第1号外显子至第7号外显子和全部内含子序列进行长片段PCR扩增、扩增产物文库制备、Illumina平台测序上机以及生物信息学分析。本发明所提供的试剂和方法可作为一种全新的、独立的、应用广泛的鉴定方法，解决了ABO精确分型的问题，发挥NGS技术对ABO基因分型高通量、结果准确的特点，在临床输血医学研究和遗传学等领域的相关应用将受到高度重视，对于医学研究单位、药学研究和试剂开发单位具有重要的现实意义。