本发明公开一种高效率农杆菌介导大豆根毛转化方法，包括如下步骤：1)获得携带目的基因的发根农杆菌菌苔，利用液体共培养培养基悬浮菌苔，调节OD600值在0.6～1.0；2)将在萌发培养基中萌发的大豆种子沿种脐剖开获得半种子，将半种子放入步骤1)制备的含有悬浮菌苔的液体共培养培养基中，侵染15～30min；3)步骤2)侵染后的半种子布于空培养容器中，23～25℃黑暗共培养3～5天；4)步骤3)共培养后的半种子切去根部，布于培养基中，23～25℃黑暗培养，长出根后，选取长度为4～6cm的阳性根切下单独培养。本发明所述方法操作时间短，简单高效，发根率高，阳性率高；且外植体不容易被农杆菌和其他杂菌污染。