公开(公告)号：CN116731160A

公开(公告)日：2023-09-12

申请号：CN202310705045.8

申请日：2023-06-14

Applicant: 青海大学

Inventor： 孙亚丽 ,  李积旭 ,  康明 ,  马鹤嘉

IPC: C07K14/81 ,  C07K14/435 ,  C12N15/70 ,  A61K39/00 ,  A61P33/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种抗长角血蜱的重组蛋白疫苗及其制备方法，属于生物医药技术领域，所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其制备方法包括重组载体构建、大肠杆菌转化、表达及纯化。本发明从长角血蜱在叮咬宿主的过程中与凝血机制有关的分泌蛋白入手，制备出重组蛋白疫苗，能够抵抗长角血蜱的抗凝血机制，能够抑制长角血蜱长时间吸血，和传统灭活疫苗对比避免了散毒的可能性，减少了对动物的伤害，并且更加高效，对于长角血蜱的叮咬和传代有一定的干扰作用，相对于传统化学药物增强了对宿主动物的保护性，减少了对动物的伤害，并且更加高效，具有较好的应用前景和推广价值。

公开(公告)号：CN114853883B

公开(公告)日：2023-05-16

申请号：CN202210488867.0

申请日：2022-05-06

Applicant: 青海大学

Inventor： 孙亚丽 ,  李积旭 ,  康明 ,  马鹤嘉 ,  劳彦君 ,  孙雪 ,  张薇

IPC: C07K14/81 ,  C12N15/15 ,  C12N15/70 ,  C07K16/38 ,  C07K16/06

Abstract: 本发明公开了一种青海血蜱丝氨酸蛋白酶抑制剂及其多克隆抗体，属于生物技术领域，通过青海血蜱的RNA样本反转录出第一链的cDNA，然后通过5'RACE和3'RACE技术扩增得到青海血蜱丝氨酸蛋白酶抑制剂基因cDNA全长序列，并进行核苷酸序列的测定，而后通过携带基因序列的克隆载体进行基因编码区的克隆；通过宿主菌进行原核表达，制备编码青海血蜱丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的蛋白抗原，并确定其氨基酸序列；获得纯化后的青海血蜱丝氨酸蛋白酶抑制剂后，用其免疫BALB/c小鼠，3次免疫之后，使用抗原亲和纯化的方法获得针对青海血蜱丝氨酸蛋白酶抑制剂的特异性多克隆抗体，为疫苗的研发做准备。

公开(公告)号：CN115120711A

公开(公告)日：2022-09-30

申请号：CN202210940690.3

申请日：2022-08-06

Applicant: 青海大学

Inventor： 孙亚丽 ,  李积旭 ,  马鹤嘉 ,  劳彦君

IPC: A61K39/00 ,  A61P33/14 ,  C12N15/70 ,  C12N15/12 ,  C07K1/22 ,  C07K1/34 ,  C07K1/36 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种针对青海血蜱的重组蛋白疫苗及其制备方法，属于生物医药技术领域，成分为rHqipin可溶性重组蛋白；将pGEX‑4T‑1‑serpin质粒成功转化后的大肠杆菌复苏并培养，收集菌体并破碎、离心获取含有rHqipin可溶性重组蛋白的上清液，将rHqipin可溶性重组蛋白纯化，得到针对青海血蜱的重组蛋白疫苗；和传统灭活疫苗对比避免了散毒的可能性减少了对动物的伤害，并且更加高效；该重组疫苗对于青海血蜱的叮咬和传代有良好的干扰作用，具有较好的应用前景和推广价值，也为其余蜱种相关疫苗研制奠定基础。

公开(公告)号：CN114853883A

公开(公告)日：2022-08-05

申请号：CN202210488867.0

申请日：2022-05-06

Applicant: 青海大学

Inventor： 孙亚丽 ,  李积旭 ,  康明 ,  马鹤嘉 ,  劳彦君 ,  孙雪 ,  张薇

IPC: C07K14/81 ,  C12N15/15 ,  C12N15/70 ,  C07K16/38 ,  C07K16/06

Abstract: 本发明公开了一种青海血蜱丝氨酸蛋白酶抑制剂及其多克隆抗体，属于生物技术领域，通过青海血蜱的RNA样本反转录出第一链的cDNA，然后通过5'RACE和3'RACE技术扩增得到青海血蜱丝氨酸蛋白酶抑制剂基因cDNA全长序列，并进行核苷酸序列的测定，而后通过携带基因序列的克隆载体进行基因编码区的克隆；通过宿主菌进行原核表达，制备编码青海血蜱丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的蛋白抗原，并确定其氨基酸序列；获得纯化后的青海血蜱丝氨酸蛋白酶抑制剂后，用其免疫BALB/c小鼠，3次免疫之后，使用抗原亲和纯化的方法获得针对青海血蜱丝氨酸蛋白酶抑制剂的特异性多克隆抗体，为疫苗的研发做准备。