非离体鉴定牡丹休眠解除相关基因的方法及基因PsEMF2和应用

    公开(公告)号:CN117844966A

    公开(公告)日:2024-04-09

    申请号:CN202410183348.2

    申请日:2024-02-19

    Abstract: 本发明公开了一种非离体鉴定牡丹休眠解除相关基因的方法及基因PsEMF2和应用,属于分子生物学领域,所述方法通过构建目标基因超表达载体转化农杆菌EHA105,剪取低温处理5‑10天带顶芽的牡丹休眠枝条,利用农杆菌侵染牡丹花芽,侵染后的花芽嫁接在‘凤丹’或芍药砧木上,黑暗条件共培养2‑4d,转移到20‑25℃温室培养,5‑10天检测目标基因表达量,7‑35天统计花芽萌动率,分析超表达目标基因是否促进了牡丹花芽快速萌动,并判断该基因是否调控休眠解除。本发明方法可以直接通过萌动率揭示候选基因的功能,同时避开了组培再生和移栽困难的问题。利用该方法发现超表达PsEMF2促进了牡丹芽内休眠解除,是休眠解除的正调控因子。

    鉴定牡丹花芽内休眠解除相关基因功能的方法及基因PsmiR172b应用

    公开(公告)号:CN116042700B

    公开(公告)日:2025-03-14

    申请号:CN202211283962.3

    申请日:2022-10-20

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定牡丹花芽内休眠解除相关基因功能的方法及基因PsmiR172b应用,属于植物基因工程技术领域,所述方法通过构建目标基因VIGS载体转化农杆菌EHA105,牡丹花芽消毒处理后,利用农杆菌侵染牡丹花芽,在1/2MS+100mM乙酰丁香酮培养基上,8℃黑暗条件共培养3d,转移到1/2MS+200mg/mL特美汀培养基上光照培养,5天后检测目标基因表达量和花芽生长状态。本发明创造性的将组织培养和VIGS结合起来,并根据沉默目标基因后花芽相对生长量变化鉴定休眠解除相关基因,避开了牡丹组培再生困难、童期长、休眠状态下无法直接侵染等问题,实现了休眠解除相关基因的快速鉴定。

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