一种去除百日咳组分菌毛蛋白2/3内毒素的方法

    公开(公告)号:CN110358802A

    公开(公告)日:2019-10-22

    申请号:CN201910757403.3

    申请日:2019-08-16

    Abstract: 本发明涉及生物制药技术领域,公开了一种去除百日咳组分菌毛蛋白2/3内毒素的方法。本方法将百日咳杆菌发酵培养后,离心收集菌体,菌体用尿素磷酸盐缓冲液抽提;离心收集上清,使用PEG-8000和硫酸铵分别进行沉淀;沉淀使用磷酸盐缓冲液抽提,然后离心收集上清液,采用Q-Sepharose层析柱处理,使用含氯化钠的磷酸盐缓冲液洗脱出Fim2/3组分。本发明联合PEG8000沉淀、硫酸铵沉淀和Q-Sepharose层析柱处理三个操作,通过多重手段去除菌毛蛋白Fim2/3中的内毒素,可以在不带入外源物质的前提下,保持有效成分Fim2/3生物活性和回收率,同时将Fim2/3中的内毒素去除至10EU/mg以下。

    一种去除百日咳组分菌毛蛋白2/3内毒素的方法

    公开(公告)号:CN110358802B

    公开(公告)日:2021-06-18

    申请号:CN201910757403.3

    申请日:2019-08-16

    Abstract: 本发明涉及生物制药技术领域,公开了一种去除百日咳组分菌毛蛋白2/3内毒素的方法。本方法将百日咳杆菌发酵培养后,离心收集菌体,菌体用尿素磷酸盐缓冲液抽提;离心收集上清,使用PEG‑8000和硫酸铵分别进行沉淀;沉淀使用磷酸盐缓冲液抽提,然后离心收集上清液,采用Q‑Sepharose层析柱处理,使用含氯化钠的磷酸盐缓冲液洗脱出Fim2/3组分。本发明联合PEG8000沉淀、硫酸铵沉淀和Q‑Sepharose层析柱处理三个操作,通过多重手段去除菌毛蛋白Fim2/3中的内毒素,可以在不带入外源物质的前提下,保持有效成分Fim2/3生物活性和回收率,同时将Fim2/3中的内毒素去除至10EU/mg以下。

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