公开(公告)号：CN115820702B

公开(公告)日：2025-03-28

申请号：CN202211494822.0

申请日：2022-11-26

Applicant: 郑州轻工业大学

Inventor： 杨雪鹏 ,  王光路 ,  刘兰茜 ,  胡仙妹 ,  钟桂芳 ,  王冰洋 ,  王梦圆 ,  李乾

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N15/55 ,  C12N15/59 ,  C12N15/60 ,  C12N15/31 ,  C12P7/02 ,  C12R1/19

Abstract: 冷杉醇降解产生龙涎香香气物质，可改善烟草香味品质，广泛应用于香料工业。本发明开发了一种低成本、高效的静息细胞催化制备冷杉醇新方法。通过敲除去磷酸化酶编码基因phoA、ybjG、pgpB及外膜脂蛋白编码基因nlp Ⅰ，组成型过表达脂肪酸代谢转录调节子编码基因fadR和甘油代谢操纵子基因glpFK，过表达羟乙基噻唑激酶、异戊烯基磷酸激酶、异戊烯基二磷酸δ‑异构酶、双功能二磷酸法呢基合酶、香叶基香叶基二磷酸合酶、赖百当‑13‑烯‑8‑醇二磷酸合酶和冷杉醇合酶获得重组大肠杆菌。采用静息细胞催化工艺可于24h催化3.0g/L异戊烯醇生成1.80g/L冷杉醇，转化率达71.15％，远高于目前文献及专利报道水平。静息细胞可重复使用5‑6次，操作简单、经济性好，相比发酵法有更佳的规模制备冷杉醇潜力。

公开(公告)号：CN115820702A

公开(公告)日：2023-03-21

申请号：CN202211494822.0

申请日：2022-11-26

Applicant: 郑州轻工业大学

Inventor： 杨雪鹏 ,  王光路 ,  刘兰茜 ,  胡仙妹 ,  钟桂芳 ,  王冰洋 ,  王梦圆 ,  李乾

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N15/55 ,  C12N15/59 ,  C12N15/60 ,  C12N15/31 ,  C12P7/02 ,  C12R1/19

Abstract: 冷杉醇降解产生龙涎香香气物质，可改善烟草香味品质，广泛应用于香料工业。本发明开发了一种低成本、高效的静息细胞催化制备冷杉醇新方法。通过敲除去磷酸化酶编码基因phoA、ybjG、pgpB及外膜脂蛋白编码基因nlpⅠ，组成型过表达脂肪酸代谢转录调节子编码基因fadR和甘油代谢操纵子基因glpFK，过表达羟乙基噻唑激酶、异戊烯基磷酸激酶、异戊烯基二磷酸δ‑异构酶、双功能二磷酸法呢基合酶、香叶基香叶基二磷酸合酶、赖百当‑13‑烯‑8‑醇二磷酸合酶和冷杉醇合酶获得重组大肠杆菌。采用静息细胞催化工艺可于24h催化3.0g/L异戊烯醇生成1.80g/L冷杉醇，转化率达71.15％，远高于目前文献及专利报道水平。静息细胞可重复使用5‑6次，操作简单、经济性好，相比发酵法有更佳的规模制备冷杉醇潜力。