公开(公告)号：CN112941090A

公开(公告)日：2021-06-11

申请号：CN202110275886.0

申请日：2021-03-15

Applicant: 辽宁大学

Inventor： 胡风庆 ,  赵小慧 ,  吴停停

IPC: C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P7/62 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开一种恶臭假单胞菌烯醇酶基因克隆方法与应用。本发明针对PHA合酶在粗甘油中耐受力比较弱的问题，从恶臭假单胞菌烯醇酶基因组出发，加入引物PCR成功扩增得到1290bp的片段，通过酶切连接成功构建了载体pET28a‑Eno，经酶切和测序验证正确后转化进入大肠杆菌BL21中获得表达重组菌。对重组菌诱导表达的两个条件IPTG浓度和温度进行优化，成功使Eno包涵体表达大量可溶表达。这对于利用价格低廉的生物柴油副产物甘油合成PHA，解决生物柴油副产物过度积累带来的环境问题，降低PHA的生产成本具有重要意义。

公开(公告)号：CN112899316B

公开(公告)日：2024-02-20

申请号：CN202110214750.9

申请日：2021-02-26

Applicant: 辽宁大学

Inventor： 胡风庆 ,  赵小慧 ,  辛知纯

IPC: C12N1/20 ,  C12P7/62

Abstract: 本发明涉及PHA生物合成领域，具体涉及一种新型生产PHA的方法。具体实施方案是：以起皱假单胞菌为出发菌株，利用起皱假单胞菌pBBR1MCS2‑phaC1、pBBR1MCS2‑phaC2的表达质粒，选用果糖、甘油、月桂酸、葡萄糖酸钠、油酸钠等不同碳源验证起皱假单胞菌pBBR1MCS2‑phaC2合酶功能活性，结果表明重组菌可以利用油酸钠为碳源产生了PHA。从而保证了今后嵌合酶的成功构建，嵌合PHA合酶可以扩展其底物的广泛性，以提高PHA产量，极大的促进PHA的广泛应用。

公开(公告)号：CN112899316A

公开(公告)日：2021-06-04

申请号：CN202110214750.9

申请日：2021-02-26

Applicant: 辽宁大学

Inventor： 胡风庆 ,  赵小慧 ,  辛知纯

IPC: C12P7/62 ,  C12N1/20 ,  C12R1/38

Abstract: 本发明涉及PHA生物合成领域，具体涉及一种新型生产PHA的方法。具体实施方案是：以起皱假单胞菌为出发菌株，利用起皱假单胞菌pBBR1MCS2‑phaC1、pBBR1MCS2‑phaC2的表达质粒，选用果糖、甘油、月桂酸、葡萄糖酸钠、油酸钠等不同碳源验证起皱假单胞菌pBBR1MCS2‑phaC2合酶功能活性，结果表明重组菌可以利用油酸钠为碳源产生了PHA。从而保证了今后嵌合酶的成功构建，嵌合PHA合酶可以扩展其底物的广泛性，以提高PHA产量，极大的促进PHA的广泛应用。