公开(公告)号：CN107217075B

公开(公告)日：2021-07-02

申请号：CN201710509552.9

申请日：2017-06-28

Applicant: 西安交通大学医学院第一附属医院

Inventor： 折剑青 ,  袁祖贻 ,  吴岳 ,  邓杨阳 ,  娄博文

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/11 ,  C12N15/70 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明提供了一种构建EPO基因敲除斑马鱼动物模型的方法及及引物、质粒与制备方法，属于生物医学技术领域。包括步骤：1)建立EPO基因敲除斑马鱼CRISPR寡聚物序列质粒；2)基于CRISPR基因敲除技术建立并培育EPO基因敲除斑马鱼模型；其中，步骤1)具体包括：1‑1)针对EPO外显子2区域靶序列进行引物设计和引物合成；1‑2)合成含有EPO靶序列的大肠杆菌质粒。本发明提供的构建EPO基因敲除斑马鱼动物模型的方法，能够构建EPO基因敲除斑马鱼动物模型，方便对EPO的进一步认识和研究。

公开(公告)号：CN108588121B

公开(公告)日：2020-06-23

申请号：CN201810204392.1

申请日：2018-03-13

Applicant: 西安交通大学医学院第一附属医院

Inventor： 折剑青 ,  袁祖贻 ,  吴岳 ,  周博 ,  梁潇 ,  娄博文 ,  邓杨阳

IPC: C12N15/85 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明提供了一种诱导Epoa基因敲除斑马鱼胚胎纯合子血红蛋白表型的方法，该方法通过对Epoa基因敲除斑马鱼胚胎纯合子的Epob基因进行基因沉寂来诱导Epoa基因敲除斑马鱼胚胎纯合子血红蛋白表型。本发明的方法提出了通过对Epob基因进行基因沉寂来诱导Epoa基因敲除斑马鱼胚胎纯合子血红蛋白表型，该方法操作简单，诱导效果稳定、明显。在本发明的方法过程中还能够对单一斑马鱼胚胎同时实现基因测序及RT‑PCR测定。

公开(公告)号：CN108588121A

公开(公告)日：2018-09-28

申请号：CN201810204392.1

申请日：2018-03-13

Applicant: 西安交通大学医学院第一附属医院

Inventor： 折剑青 ,  袁祖贻 ,  吴岳 ,  周博 ,  梁潇 ,  娄博文 ,  邓杨阳

IPC: C12N15/85 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明提供了一种诱导Epoa基因敲除斑马鱼胚胎纯合子血红蛋白表型的方法，该方法通过对Epoa基因敲除斑马鱼胚胎纯合子的Epob基因进行基因沉寂来诱导Epoa基因敲除斑马鱼胚胎纯合子血红蛋白表型。本发明的方法提出了通过对Epob基因进行基因沉寂来诱导Epoa基因敲除斑马鱼胚胎纯合子血红蛋白表型，该方法操作简单，诱导效果稳定、明显。在本发明的方法过程中还能够对单一斑马鱼胚胎同时实现基因测序及RT-PCR测定。

公开(公告)号：CN107217075A

公开(公告)日：2017-09-29

申请号：CN201710509552.9

申请日：2017-06-28

Applicant: 西安交通大学医学院第一附属医院

Inventor： 折剑青 ,  袁祖贻 ,  吴岳 ,  邓杨阳 ,  娄博文

IPC: C12N15/90 ,  C12N15/11 ,  C12N15/70 ,  A01K67/027

CPC classification number: C12N15/902 ,  A01K67/0276 ,  A01K2217/075 ,  A01K2227/40 ,  A01K2267/03 ,  C07K14/505 ,  C12N9/22 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明提供了一种构建EPO基因敲除斑马鱼动物模型的方法及及引物、质粒与制备方法，属于生物医学技术领域。包括步骤：1)建立EPO基因敲除斑马鱼CRISPR寡聚物序列质粒；2)基于CRISPR基因敲除技术建立并培育EPO基因敲除斑马鱼模型；其中，步骤1)具体包括：1‑1)针对EPO外显子2区域靶序列进行引物设计和引物合成；1‑2)合成含有EPO靶序列的大肠杆菌质粒。本发明提供的构建EPO基因敲除斑马鱼动物模型的方法，能够构建EPO基因敲除斑马鱼动物模型，方便对EPO的进一步认识和研究。

公开(公告)号：CN207964652U

公开(公告)日：2018-10-12

申请号：CN201820344723.7

申请日：2018-03-13

Applicant: 西安交通大学医学院第一附属医院

Inventor： 折剑青 ,  袁祖贻 ,  吴岳 ,  周博 ,  梁潇 ,  娄博文 ,  邓杨阳

IPC: G01N21/84 ,  C12Q1/6869 ,  G01N1/36 ,  G01N1/42

Abstract: 本实用新型公开了一种同时进行斑马鱼胚胎基因测序及表型观察的实验装置，包括孔板主体，孔板主体上设置有沿着横向和纵向均呈阵列式分布的试剂孔，所述的孔板主体配套有制槽顶盖和切割顶盖；所述的制槽顶盖的底面上设置有第一顶塞，每个第一顶塞上设置有相同的制槽板；所述的切割顶盖的底面上设置有第二顶塞，每个第二顶塞上设置有相同的切样刀；所述的切样刀所在的横向竖直平面与制槽板所在的纵向竖直平面相互垂直；所述的切样刀的竖向长度大于制槽板的竖向长度。本实用新型的装置能够简单准确实现斑马鱼胚胎的基因测序及表型观察，为斑马鱼研究提供一种简单可行的实验装置。