一种获得中华大节竹SOS1逆向转运蛋白编码基因序列的方法

    公开(公告)号:CN103773778A

    公开(公告)日:2014-05-07

    申请号:CN201410010130.3

    申请日:2014-01-10

    Abstract: 本发明公开了一种获得中华大节竹SOS1逆向转运蛋白编码基因序列的方法,包括以下步骤:提取中华大节竹幼苗的总RNA,反转录合成第1链cDNA。利用RACE方法设计特异引物IsSOS1-3′和IsSOS1-5′,分别进行3′RACE和5′RACE的扩增,通过巢式PCR分别获得3′和5′片段;用Vector?NTI12软件拼接中间、3′和5′片段,获得了IsSOS1基因全长cDNA序列,设计特异引物IsSOS1-F2和IsSOS1-R2,通过PCR扩增,得到长度为3516bp的cDNA序列。本发明的SOS1逆向转运蛋白及其编码基因可以用来提高植物抗病性和抗盐性,可用于植物的遗传转化,提高植物的耐盐能力,使竹类植物能生长在滨海盐渍土地上,有利于竹类植物作为滨海防护林的种植,这种措施的经济效益是十分可观的,发挥了巨大作用。

    一种基于转录组序列开发绿绒蒿SSR引物的方法

    公开(公告)号:CN106834510A

    公开(公告)日:2017-06-13

    申请号:CN201710167289.X

    申请日:2017-03-20

    Abstract: 本发明涉及一种基于转录组序列开发绿绒蒿SSR引物的方法,具体步骤如下:(1)构建转录组文库;(2)测序完成后,利用软件Trinity将测序序列拼接成一个完整的转录组,取每条基因最长的转录本作为Unigene,并对Unigene序列进行生物信息学分析;(3)采用软件MISA1.0对上述Unigene进行SSR检测;(4)采用软件Primer3进行SSR引物设计,并鉴定引物的多态性。本发明通过获得的转录组序列,极大地增加了用于引物开发的原始数据;采用生物信息学途径可以大批量开发SSR标记,大大提高了开发的效率,而且本发明所提供的SSR标记引物是稳定存在的新标记,可直接用于绿绒蒿属植物的相关研究,解决了绿绒蒿属SSR引物少问题。

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