公开(公告)号：CN119470927B

公开(公告)日：2025-04-08

申请号：CN202510059846.0

申请日：2025-01-15

Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院 ,  深圳湾实验室

Inventor： 张鑫禹 ,  李刚 ,  杨博

IPC: C07K1/13 ,  C07K19/00 ,  C12N15/867 ,  C12N5/10 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明涉及融合蛋白、重组载体、宿主细胞及蛋白‑蛋白相互作用鉴定方法。所述鉴定方法包括步骤：将光敏蛋白、目标蛋白和Avi标签进行融合表达，获得含有融合蛋白的第一体系；采用可见光对所述第一体系进行光照处理，使得所述目标蛋白的相互作用蛋白与所述融合蛋白交联形成蛋白复合体；利用Avi标签进行生物素化处理，分离纯化带有生物素标记的蛋白复合体，进行蛋白质组学分析，获得所述相互作用蛋白的信息。所述鉴定方法的标记半径为零，结果置信度远超现有技术；生物素富集的方法降低了非特异性吸附；无需对活细胞进行任何试剂处理，最大程度还原细胞真实状态下的蛋白质相互作用组；利用光照激发，能以时间分辨的方式进行应用。

公开(公告)号：CN119470927A

公开(公告)日：2025-02-18

申请号：CN202510059846.0

申请日：2025-01-15

Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院 ,  深圳湾实验室

Inventor： 张鑫禹 ,  李刚 ,  杨博

IPC: G01N33/68 ,  C07K19/00 ,  C12N15/867 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明涉及融合蛋白、重组载体、宿主细胞及蛋白‑蛋白相互作用鉴定方法。所述鉴定方法包括步骤：将光敏蛋白、目标蛋白和Avi标签进行融合表达，获得含有融合蛋白的第一体系；采用可见光对所述第一体系进行光照处理，使得所述目标蛋白的相互作用蛋白与所述融合蛋白交联形成蛋白复合体；利用Avi标签进行生物素化处理，分离纯化带有生物素标记的蛋白复合体，进行蛋白质组学分析，获得所述相互作用蛋白的信息。所述鉴定方法的标记半径为零，结果置信度远超现有技术；生物素富集的方法降低了非特异性吸附；无需对活细胞进行任何试剂处理，最大程度还原细胞真实状态下的蛋白质相互作用组；利用光照激发，能以时间分辨的方式进行应用。