公开(公告)号：CN118497204B

公开(公告)日：2024-12-03

申请号：CN202410946361.9

申请日：2024-07-16

Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院

Inventor： 卫亚红 ,  赵姝婷 ,  邓磊 ,  田乾易 ,  邓东涛 ,  贾淳宇

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  C12N15/31 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种质粒CRISPR‑pCas9n及基因编辑的方法与应用。本发明基于由质粒pCas9n和质粒pTarget组成的CRISPR‑pCas9n基因编辑系统，采用定点突变的方法，将所述质粒pCas9中Cas9n的活性位点Asp10或His840突变为Ala。本发明提供的方法用于细菌的单/双或三基因的定向敲除时，均表现出较好的敲除率，远高于传统的同源重组的方法和CRISPR‑Cas9基因编辑系统，且不受目的基因的长度限制。

公开(公告)号：CN118497204A

公开(公告)日：2024-08-16

申请号：CN202410946361.9

申请日：2024-07-16

Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院

Inventor： 卫亚红 ,  赵姝婷 ,  邓磊 ,  田乾易 ,  邓东涛 ,  贾淳宇

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C12N1/21 ,  C12N15/74 ,  C12N15/31 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种质粒CRISPR‑pCas9n及基因编辑的方法与应用。本发明基于由质粒pCas9n和质粒pTarget组成的CRISPR‑pCas9n基因编辑系统，采用定点突变的方法，将所述质粒pCas9中Cas9n的活性位点Asp10或His840突变为Ala。本发明提供的方法用于细菌的单/双或三基因的定向敲除时，均表现出较好的敲除率，远高于传统的同源重组的方法和CRISPR‑Cas9基因编辑系统，且不受目的基因的长度限制。