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公开(公告)号：CN111117941B
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN201911403588.4
申请日：2019-12-31
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , C12N15/66 , G01N33/569 , C12R1/01
Abstract: 一种猪种布鲁氏菌IalB基因缺失菌株及其构建方法和应用，该菌株是通过卡那霉素抗性基因替换猪种布鲁氏菌IalB基因得到的，其主要步骤为：以猪种布鲁氏菌S2疫苗株基因组为模板，PCR扩增得到IalB基因上、下游同源臂，与同样PCR扩增得到的卡那霉素抗性基因片段一起克隆入pUC18质粒，获得同源重组缺失质粒pUC18‑IalB‑KanR。将该质粒电转化猪种布鲁氏菌感受态细胞，经PCR鉴定，所得阳性转化子即为猪种布鲁氏菌IalB缺失菌株。与野生型菌株相比，该缺失菌株表现出细胞聚合性增强、生长活力减弱等特点，提示该缺失菌株可作为制备布鲁氏菌减毒活疫苗的良好材料。
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公开(公告)号：CN111117941A
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201911403588.4
申请日：2019-12-31
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , C12N15/66 , G01N33/569 , C12R1/01
Abstract: 一种猪种布鲁氏菌IalB基因缺失菌株及其构建方法和应用，该菌株是通过卡那霉素抗性基因替换猪种布鲁氏菌IalB基因得到的，其主要步骤为：以猪种布鲁氏菌S2疫苗株基因组为模板，PCR扩增得到IalB基因上、下游同源臂，与同样PCR扩增得到的卡那霉素抗性基因片段一起克隆入pUC18质粒，获得同源重组缺失质粒pUC18-IalB-KanR。将该质粒电转化猪种布鲁氏菌感受态细胞，经PCR鉴定，所得阳性转化子即为猪种布鲁氏菌IalB缺失菌株。与野生型菌株相比，该缺失菌株表现出细胞聚合性增强、生长活力减弱等特点，提示该缺失菌株可作为制备布鲁氏菌减毒活疫苗的良好材料。
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公开(公告)号：CN110699312B
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN201911190912.9
申请日：2019-11-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 一株猪种布鲁氏菌BI‑1基因缺失菌株及其构建方法和应用，该菌株是通过卡那霉素抗性基因替换猪种布鲁氏菌BI‑1基因得到的，其主要步骤为：以猪种布鲁氏菌S2疫苗株基因组为模板，PCR扩增得到BI‑1基因上、下游同源臂，与同样PCR扩增得到的卡那霉素抗性基因片段一起克隆入pUC18质粒，获得同源重组缺失质粒pUC18‑BI1‑KanR。将该质粒电转化猪种布鲁氏菌感受态细胞，经PCR鉴定，所得阳性转化子即为猪种布鲁氏菌BI‑1缺失菌株。与野生型菌株相比，该缺失菌株表现出生长速度减缓，菌落减小，细胞膜通透性增加，细胞聚合性增强等特点，提示该缺失菌株具有作为布鲁氏菌减毒活疫苗的潜质。
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公开(公告)号：CN110699312A
公开(公告)日：2020-01-17
申请号：CN201911190912.9
申请日：2019-11-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 一株猪种布鲁氏菌BI-1基因缺失菌株及其构建方法和应用，该菌株是通过卡那霉素抗性基因替换猪种布鲁氏菌BI-1基因得到的，其主要步骤为：以猪种布鲁氏菌S2疫苗株基因组为模板，PCR扩增得到BI-1基因上、下游同源臂，与同样PCR扩增得到的卡那霉素抗性基因片段一起克隆入pUC18质粒，获得同源重组缺失质粒pUC18-BI1-KanR。将该质粒电转化猪种布鲁氏菌感受态细胞，经PCR鉴定，所得阳性转化子即为猪种布鲁氏菌BI-1缺失菌株。与野生型菌株相比，该缺失菌株表现出生长速度减缓，菌落减小，细胞膜通透性增加，细胞聚合性增强等特点，提示该缺失菌株具有作为布鲁氏菌减毒活疫苗的潜质。
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