提高遗传转化效率的Cas9启动子、基因编辑载体、构建方法及应用

    公开(公告)号:CN116083399B

    公开(公告)日:2024-09-20

    申请号:CN202211222430.9

    申请日:2022-10-08

    Abstract: 本发明公开了一种提高遗传转化效率的Cas9基因启动子、编辑载体、构建方法和应用,属于基因编辑领域,针对CRISPR/Cas9载体的T‑DNA插入片段表达活性进行优化,降低了转基因沉默的概率,提高了西瓜中的遗传转化效率和基因编辑效率。所述编辑载体在pBSE402的基础上,对Cas9基因进行西瓜密码子优化后,以西瓜内源泛素基因的启动子去驱动Cas9基因的表达,行成新型CRISPR/Cas9基因编辑载体pBUE702C,将西瓜的遗传转化效率从1.20%提高到10.41%,同时基因编辑效率也从53.88%提高到68.11%,该载体在提高了遗传转化效率的同时,还增加了基因编辑效率,对未来加快西瓜的基因功能研究和分子育种技术具有重要意义。

    一种通过基因编辑ClCKI1创制二倍体无籽西瓜的方法

    公开(公告)号:CN118028364B

    公开(公告)日:2025-03-11

    申请号:CN202410266951.7

    申请日:2024-03-08

    Abstract: 本发明公开了一种通过基因编辑ClCKI1创制二倍体无籽西瓜的方法,属于植物基因工程育种技术领域。本发明公开的一种通过基因编辑ClCKI1创制二倍体无籽西瓜的方法,首次利用CRISPR/Cas9技术,对西瓜ClCKI1基因进行靶向编辑,使其基因功能缺失,雌配子不育,自交授粉果实正常膨大,双受精无法形成合子,种子败育,只有少量白壳种子产生,从而创制二倍体无籽西瓜。通过本发明方法创制的二倍体无籽西瓜编辑植株与野生型材料相比,除了雌配子不育,营养生长阶段和雄配子均无明显表型变化。该方法具有简单易行、效率高、成本低和周期短等优点。

    一种通过基因编辑ClSPO11-2创制二倍体无籽西瓜的方法

    公开(公告)号:CN118374544B

    公开(公告)日:2025-03-07

    申请号:CN202410266946.6

    申请日:2024-03-08

    Abstract: 本发明公开了一种通过基因编辑ClSPO11‑2创制二倍体无籽西瓜的方法,属于植物基因工程育种技术领域。本发明公开的一种通过基因编辑ClSPO11‑2创制二倍体无籽西瓜的方法,首次利用CRISPR/Cas9技术,对西瓜ClSPO11‑2基因进行靶向编辑,减数分裂无法配对联会,雌雄配子不育,使其基因功能缺失,双受精后种子败育,从而在二倍体水平创制无籽西瓜。通过本方法创制的二倍体无籽西瓜编辑植株与野生型材料相比,除了雌雄配子不育,营养生长阶段表型均无发生明显变化,无籽表型可以通过Clspo11‑2/ClSPO11‑2杂合编辑的植株无限繁殖。该方法具有简单易操作、效率高、成本低和周期短等优点。

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