公开(公告)号：CN110218809B

公开(公告)日：2022-04-22

申请号：CN201910609216.0

申请日：2019-07-08

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 赵光辉 ,  宋军科 ,  王一 ,  王钰鑫 ,  李媛

IPC: C12Q1/6893 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明为一种鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性扩增引物及其PCR检测方法，其设计特异性引物并建立用于检测毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性PCR检测方法，为鸡毒害艾美耳球虫的临床检测应用和推广提供理论依据和技术支撑。本发明采用的技术方案为：所述特异性引物序列如下：SP4124‑F：5’‑ACTACACAAGTCCCGTCAAAC‑3’；SP4124‑R：5’‑CTATGCTGTCTTCCTCTATCCC‑3’。特异性引物在检测鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊中的PCR检测方法为：首先富集纯化待测样本中的卵囊，提取卵囊总RNA并通过反转录得到cDNA，然后以上述cDNA为模板，用特异性引物进行PCR扩增并对扩增产物进行电泳检测，若电泳结果出现444bp的特异条带，提示待测样本中存在毒害艾美耳球虫孢子化卵囊。

公开(公告)号：CN110157826B

公开(公告)日：2022-04-22

申请号：CN201910432125.4

申请日：2019-05-23

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 赵光辉 ,  宋军科 ,  王一 ,  董和平 ,  王钰鑫 ,  李媛

IPC: C12Q1/6893 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明为一种鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性引物及PCR检测方法，其设计特异性引物并建立用于检测毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性PCR检测方法，为鸡毒害艾美耳球虫的临床检测应用和推广提供理论依据和技术支撑。本发明采用的技术方案为：所述特异性引物序列如下：SP2908‑F：5’‑GACAATCATACA CACTGGGC‑3’；SP2908‑R：5’‑AGATGCCTC TTCCAAAGC‑3’。特异性引物在检测鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊中的PCR检测方法为：以待测样本的cDNA为模板，以特异性引物作为扩增引物进行PCR扩增，对扩增产物进行电泳检测，若电泳结果出现286bp目的条带，则待测样本为毒害艾美耳球虫孢子化卵囊。

公开(公告)号：CN111118189A

公开(公告)日：2020-05-08

申请号：CN202010014664.9

申请日：2020-01-07

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王钰鑫 ,  王一 ,  许丹娜 ,  宋军科 ,  赵光辉 ,  李媛 ,  董和平

IPC: C12Q1/6893 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/90

Abstract: 本发明涉及寄生虫检测技术领域，具体涉及一种牛微小隐孢子虫特异性引物及其PCR检测方法和应用。该方法能够快速、敏感、特异地检测出样品中的微小隐孢子虫。本发明牛微小隐孢子虫特异性引物序列为：上游引物CpF：5’-AGTGGTTACAGGTGGGATGAGT-3’；下游引物CpR：5’-GCGAGTTTCCTTGATTCATAGC-3’；该引物的普通PCR和纳米PCR检测方法：首先从待测样本中提取微小隐孢子虫的DNA，然后以DNA为模板，用特异性引物进行PCR扩增并对扩增产物进行电泳检测，若电泳结果出现410 bp左右的特异性条带，则表明样本中存在牛微小隐孢子虫。

公开(公告)号：CN110218809A

公开(公告)日：2019-09-10

申请号：CN201910609216.0

申请日：2019-07-08

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 赵光辉 ,  宋军科 ,  王一 ,  王钰鑫 ,  李媛

IPC: C12Q1/6893 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明为一种鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性扩增引物及其PCR检测方法，其设计特异性引物并建立用于检测毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性PCR检测方法，为鸡毒害艾美耳球虫的临床检测应用和推广提供理论依据和技术支撑。本发明采用的技术方案为：所述特异性引物序列如下：SP4124-F：5’-ACTACACAAGTCCCGTCAAAC-3’；SP4124-R：5’-CTATGCTGTCTTCCTCTATCCC-3’。特异性引物在检测鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊中的PCR检测方法为：首先富集纯化待测样本中的卵囊，提取卵囊总RNA并通过反转录得到cDNA，然后以上述cDNA为模板，用特异性引物进行PCR扩增并对扩增产物进行电泳检测，若电泳结果出现444bp的特异条带，提示待测样本中存在毒害艾美耳球虫孢子化卵囊。

公开(公告)号：CN110157826A

公开(公告)日：2019-08-23

申请号：CN201910432125.4

申请日：2019-05-23

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 赵光辉 ,  宋军科 ,  王一 ,  董和平 ,  王钰鑫 ,  李媛

IPC: C12Q1/6893 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明为一种鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性引物及PCR检测方法，其设计特异性引物并建立用于检测毒害艾美耳球虫孢子化卵囊的特异性PCR检测方法，为鸡毒害艾美耳球虫的临床检测应用和推广提供理论依据和技术支撑。本发明采用的技术方案为：所述特异性引物序列如下：SP2908-F：5’-GACAATCATACACACTGGGC-3’；SP2908-R：5’-AGATGCCTCTTCCAAAGC-3’。特异性引物在检测鸡毒害艾美耳球虫孢子化卵囊中的PCR检测方法为：以待测样本的cDNA为模板，以特异性引物作为扩增引物进行PCR扩增，对扩增产物进行电泳检测，若电泳结果出现286bp目的条带，则待测样本为毒害艾美耳球虫孢子化卵囊。