公开(公告)号：CN103805692A

公开(公告)日：2014-05-21

申请号：CN201310504648.8

申请日：2013-10-23

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 陈宏 ,  王梓年 ,  蓝贤勇 ,  雷初超

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2600/124 ,  C12Q2600/156 ,  C12Q2535/138

Abstract: 本发明公开了一种快速检测秦川牛PNPLA3基因单核苷酸多态性（SNP）的RFLP方法，以包含PNPLA3基因的待测牛全基因组DNA为模板，以人为设计的引物对P1、P2、P3、P4、P5为引物，PCR扩增牛PNPLA3基因，发现27个SNP位点；从中挑选错义突变位点4个并分别设计引物对P2-BglI、P2-RsaI、P3-BmgT120I和P3-MspI。用这4对引物进行PCR扩增，并用上述四种限制性内切酶分别酶切该PCR扩增产物，再用琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物，电泳结果显示秦川牛基因PNPLA3基因第2062位、第2078位、第35800位和第35932位的单核苷酸多态性。由于PNPLA3基因涉及体重、日增重等生长性状，PNPLA3蛋白具有脂肪酶和酰基转移酶的活性而且在维持能量平衡方面也具有重要的作用，本发明所述检测方法可用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择（MAS）育种，有利于快速建立遗传资源优良的黄牛种群。

公开(公告)号：CN103805692B

公开(公告)日：2017-08-04

申请号：CN201310504648.8

申请日：2013-10-23

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 陈宏 ,  王梓年 ,  蓝贤勇 ,  雷初超

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种快速检测秦川牛PNPLA3基因单核苷酸多态性（SNP）的RFLP方法，以包含PNPLA3基因的待测牛全基因组DNA为模板，以人为设计的引物对P1、P2、P3、P4、P5为引物，PCR扩增牛PNPLA3基因，发现27个SNP位点；从中挑选错义突变位点4个并分别设计引物对P2‑BglI、P2‑RsaI、P3‑BmgT120I和P3‑MspI。用这4对引物进行PCR扩增，并用上述四种限制性内切酶分别酶切该PCR扩增产物，再用琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物，电泳结果显示秦川牛基因PNPLA3基因第2062位、第2078位、第35800位和第35932位的单核苷酸多态性。由于PNPLA3基因涉及体重、日增重等生长性状，PNPLA3蛋白具有脂肪酶和酰基转移酶的活性而且在维持能量平衡方面也具有重要的作用，本发明所述检测方法可用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择（MAS）育种，有利于快速建立遗传资源优良的黄牛种群。

公开(公告)号：CN103305609A

公开(公告)日：2013-09-18

申请号：CN201310205614.9

申请日：2013-05-29

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 陈宏 ,  王梓年 ,  刘栋 ,  马伟 ,  李爱民 ,  蓝贤勇 ,  雷初朝

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种黄牛NRIP1基因单核苷酸多态性的检测方法与应用，以包含NRIP1基因的待测牛全基因组DNA为模板，以人为设计的引物对P605为引物，PCR扩增牛NRIP1基因，用限制性内切酶AluI消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳；根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛NRIP1基因第605位的单核苷酸多态性；由于NRIP1基因涉及体重、日增重等生长性状，本发明所述检测方法为NRIP1基因的SNP与生长性状关系的建立奠定了基础，以便用于中国黄牛生长性状的标记辅助选择（MAS）育种，有利于快速建立遗传资源优良的黄牛种群。