一种奶牛瘤胃上皮细胞分离培养的方法

    公开(公告)号:CN117050929A

    公开(公告)日:2023-11-14

    申请号:CN202310408821.8

    申请日:2023-04-17

    Abstract: 本发明属于细胞分离培养技术领域,具体涉及一种奶牛瘤胃上皮细胞分离培养的方法。本发明提供的奶牛瘤胃上皮细胞分离培养的方法,包括以下步骤:取奶牛瘤胃组织,将瘤胃内容物用生理盐水冲洗干净后,将瘤胃组织钝性分离,取上皮组织备用;将瘤胃上皮组织用含抗生素的PBS缓冲液Ⅰ和II进行清洗,然后将上皮组织剪成0.25cm2的小块;使用胰蛋白酶‑EDTA消化液将瘤胃上皮组织小块在3‑5℃下冷消化18‑24h;将细胞消化液过滤、离心并洗涤,弃上清之后,细胞沉淀为瘤胃上皮细胞沉淀;将瘤胃上皮细胞沉淀用完全培养基重悬纯化后,然后于37℃和5%CO2的细胞培养箱中静置培养。该方法操作简便、省力、经济,且对实验要求不高,可获得纯度高、活性强、可冻存的瘤胃上皮细胞。

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