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公开(公告)号:CN119776444A
公开(公告)日:2025-04-08
申请号:CN202510056799.4
申请日:2025-01-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/89 , C12N15/65 , C07K14/475 , C12N15/12 , A01K67/0271 , C12N9/22 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,涉及一种快速降解MSTN蛋白的小鼠模型的构建方法,包括:在Donor载体上依次接入5’同源臂、3xEAAAK、FKBP1A基因同义突变序列、3xEAAAK、红色荧光蛋白mCherry序列和3’同源臂,得到Donor重组载体;基于Mstn基因的第三外显子设计gRNA,将gRNA、Cas9蛋白和Donor重组载体混合后注射到小鼠受精卵,体外培养,移植,得到F0代小鼠;将F0代小鼠与野生型杂交,或者将杂交后代继续配繁,获得敲入小鼠模型。本发明利用dTAG靶向蛋白降解技术,将所得纯合敲入小鼠进行dTAG给药,可以实现对MSTN蛋白快速、可逆的降解与清除。