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发明公开
一种整合牛NRAMP1巨噬细胞特异性表达载体/牛成纤维细胞及其方法无效

公开(公告)号：CN102559749A

公开(公告)日：2012-07-11

申请号：CN201010603533.0

申请日：2010-12-17

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王华岩 , 程祥 , 邓捷 , 马晓玲 , 孟书燕 , 来威锋

IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/06

Abstract: 一种整合牛NRAMP1巨噬细胞特异性表达载体/牛成纤维细胞及其方法，构建了一种包含NRAMP1巨噬细胞特异性表达载体pSP-NRAMP1-HA，以及一种基于该载体的包含NRAMP1基因的秦川牛成纤维细胞系，利用该细胞系作为核供体细胞的方法，为解决秦川牛布氏杆菌病的转基因牛提供坚实的基础。本发明通过脂质体转染法将外源性表达载体pSP-NRAMP1-HA导入牛成纤维细胞，经G418筛选获得阳性细胞，经PCR鉴定，证实目的基因NRAMP1整合到牛成纤维细胞的基因组中；最后将整合有NRAMP1基因的牛成纤维细胞作为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚。

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