公开(公告)号：CN109811034A

公开(公告)日：2019-05-28

申请号：CN201910253729.2

申请日：2019-03-30

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 杨保伟 ,  李怡谰 ,  牛沁雅 ,  盛焕精 ,  曹晨阳 ,  崔生辉 ,  瞿洪仁

IPC: C12Q1/6806

Abstract: 本发明公开了一种高纯度DNA模板的制备方法，其技术方案是：将培养的菌株置于加入无菌去离子水的PCR管中形成混合菌液，将混合菌液置于PCR仪中高温裂解，后降温冷却；然后在离心机上经12000-15000rpm离心，吸取上清液，弃除沉淀物，即获得高纯度DNA模板；依据需求将获得的高纯度DNA模板直接或经稀释后加入PCR体系进行PCR扩增。本发明降低了对后续扩增体系、特别是DNA聚合酶活性的影响，菌体高温裂解后再将裂解物冷却，可以使DNA重新快速形成螺旋，获得的DNA模板纯度高、数量多，DNA模板约占混合菌液量的67%-72%，对后续PCR扩增过程中DNA聚合酶的影响较小，极大的提高了扩增效率，减少了非特异性扩增，制备的DNA模板稳定，克服了现有DNA模板制备方法存在的缺陷。