公开(公告)号：CN110904137A

公开(公告)日：2020-03-24

申请号：CN201911062021.5

申请日：2019-11-01

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 管清美 ,  牛春东 ,  曹富国 ,  施焕然 ,  陈鹏翔

IPC: C12N15/66 ,  C12Q1/6876 ,  C12N15/11 ,  C12N15/82 ,  A01H5/12 ,  A01H6/82

Abstract: 本发明属于生物技术和植物基因工程技术领域，公开了一种Gateway克隆系统的植物表达载体及构建方法和应用，所述Gateway克隆系统的植物表达载体分别为PKGMYC，PKNYFP和PKCYFP；PKGMYC的序列为SEQ ID NO：1；PKNYFP的序列为SEQ ID NO：2；PKCYFP的序列为SEQ ID NO：3。本发明以pK7GWIWG2D(II),0或pK2GW7为骨架，这两个载体分别使用SacI/KpnI和SacI/PmeI核酸内切酶进行双酶切；通过同源重组技术将其他Gateway系列载体构建入这两个载体，形成以卡那霉素为筛选标记的植物表达载体；同时，pK7GWIWG2D(II),0为骨架的改造载体还具有非融合的GFP荧光蛋白筛选标记。

公开(公告)号：CN114158482B

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202111250967.1

申请日：2021-10-26

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 管清美 ,  牛春东 ,  张子桐 ,  曹富国 ,  钱谦 ,  刘泽远 ,  李中兴 ,  姜丽娟

IPC: A01H6/74 ,  C12N15/82 ,  A01H5/12 ,  A01H1/00 ,  A01G17/00

Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，公开了一种应用于苹果转基因药剂的应用及其浓度的筛选方法，所述应用于苹果转基因的药剂浓度筛选方法包括：通过将氯磺隆原药进行配制得到母液，并进行过滤灭菌，从而应用于无菌操作的苹果遗传转化体系。本发明提供的应用于苹果转基因的药剂浓度筛选方法，通过实验结果最终确定氯磺隆对于GL‑3转基因中的使用浓度为2～4μg/L，优先选择2μg/L；低于这个浓度范围的培养基对GL‑3的出芽起不到抑制作用，会造成一些假阳性苗的出现，增加实验的工作量；高于这个浓度范围的培养基会对GL‑3叶片造成伤害，可能会因导致叶片坏死而降低遗传转化效率。

公开(公告)号：CN116426664B

公开(公告)日：2025-04-04

申请号：CN202211232882.5

申请日：2022-10-10

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 管清美 ,  曹富国 ,  钱谦 ,  牛春东 ,  刘祥梅 ,  毛秀山

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11 ,  C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  A01H5/12 ,  A01H6/74

Abstract: 本发明属于分子生物技术与分子标记技术领域，公开了一种检测苹果叶片蜡质的SNP分子标记及其应用，检测苹果叶片蜡质的SNP分子标记包括：MdHDG5启动子上高蜡质含量种质SNP位置碱基为A/A或A/G，低蜡质含量种质SNP位置碱基为G/G。本发明通过Sanger测序以及CAPS技术验证了MdHDG5启动子上的显著的SNP，高蜡质含量种质SNP位置碱基为A/A或A/G，低蜡质含量种质SNP位置碱基为G/G，可利用这个SNP位点开发检测叶片蜡质含量高低的分子标记；通过设计特异性引物进行PCR扩增并进行测序或CAPS鉴定的方法高效、快捷、准确性高，可以极大程度的帮助缩短苹果育种年限，集中优良性状。

公开(公告)号：CN116426664A

公开(公告)日：2023-07-14

申请号：CN202211232882.5

申请日：2022-10-10

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 管清美 ,  曹富国 ,  钱谦 ,  牛春东 ,  刘祥梅 ,  毛秀山

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11 ,  C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  A01H5/12 ,  A01H6/74

Abstract: 本发明属于分子生物技术与分子标记技术领域，公开了一种检测苹果叶片蜡质的SNP分子标记及其应用，检测苹果叶片蜡质的SNP分子标记包括：MdHDG5启动子上高蜡质含量种质SNP位置碱基为A/A或A/G，低蜡质含量种质SNP位置碱基为G/G。本发明通过Sanger测序以及CAPS技术验证了MdHDG5启动子上的显著的SNP，高蜡质含量种质SNP位置碱基为A/A或A/G，低蜡质含量种质SNP位置碱基为G/G，可利用这个SNP位点开发检测叶片蜡质含量高低的分子标记；通过设计特异性引物进行PCR扩增并进行测序或CAPS鉴定的方法高效、快捷、准确性高，可以极大程度的帮助缩短苹果育种年限，集中优良性状。

公开(公告)号：CN114158482A

公开(公告)日：2022-03-11

申请号：CN202111250967.1

申请日：2021-10-26

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 管清美 ,  牛春东 ,  张子桐 ,  曹富国 ,  钱谦 ,  刘泽远 ,  李中兴 ,  姜丽娟

IPC: A01H6/74 ,  C12N15/82 ,  A01H5/12 ,  A01H1/00 ,  A01G17/00

Abstract: 本发明属于农业生物技术领域，公开了一种应用于苹果转基因药剂的应用及其浓度的筛选方法，所述应用于苹果转基因的药剂浓度筛选方法包括：通过将氯磺隆原药进行配制得到母液，并进行过滤灭菌，从而应用于无菌操作的苹果遗传转化体系。本发明提供的应用于苹果转基因的药剂浓度筛选方法，通过实验结果最终确定氯磺隆对于GL‑3转基因中的使用浓度为2～4μg/L，优先选择2μg/L；低于这个浓度范围的培养基对GL‑3的出芽起不到抑制作用，会造成一些假阳性苗的出现，增加实验的工作量；高于这个浓度范围的培养基会对GL‑3叶片造成伤害，可能会因导致叶片坏死而降低遗传转化效率。