公开(公告)号：CN119162371A

公开(公告)日：2024-12-20

申请号：CN202411550431.5

申请日：2024-11-01

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 黄丽丽 ,  徐亮胜 ,  彭兰

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明属于病原检测技术领域，本发明公开了一种检测苹果树病原菌的方法、引物与探针的组合、试剂盒。本发明设计出针对苹果树病原菌Botryosphaeria dothidea的特异性引物与探针的组合，并基于TaqMan qPCR技术建立苹果轮纹病病原菌的检测方法。经验证，本发明提供的检测方法灵敏度高、特异性好，与其他属病原菌无交叉反应，对苹果树病害的早期诊断、确定最佳防治时期、建立有效的防病策略具有重要意义。

公开(公告)号：CN118421815A

公开(公告)日：2024-08-02

申请号：CN202410875090.2

申请日：2024-07-02

Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院

Inventor： 黄丽丽 ,  徐亮胜 ,  彭兰

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/686 ,  C12R1/38

Abstract: 本发明公开了一种猕猴桃花粉中活的Psa检测方法，属于生物技术领域。本发明具体的公开了特异性检测活的猕猴桃细菌性溃疡病菌的方法，所述方法包括：优化PMA反应条件，结合常规PCR、qPCR、LAMP方法，建立PMA‑PCR、PMA‑qPCR、PMA‑LAMP方法，再提取待测花粉样品基因组DNA，以所述基因组DNA为模板，用上述检测活的猕猴桃细菌性溃疡病菌的方法进行检测。本发明的检测方法快速、准确、特异性好、灵敏度高，能够有效避免死菌影响，且对活菌检测无影响。对猕猴桃细菌性溃疡病菌菌悬液最低检测限为1×102CFU/mL，可为猕猴桃细菌性溃疡病的早期诊断和病害防控提供快速便捷的技术手段。

公开(公告)号：CN116445639A

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202310469333.8

申请日：2023-04-27

Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院

Inventor： 黄丽丽 ,  徐亮胜 ,  刘海龙

IPC: C12Q1/689 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6844 ,  C12R1/38

Abstract: 本发明公开了一种由正向引物、反向引物和探针引物构成的引物组合物。正向引物的序列如SEQ ID No.1所示，反向引物的序列如SEQ ID No.2所示，探针引物的序列如SEQ ID No.3所示，设计所述引物组合物的靶标序列为丁香假单胞菌猕猴桃致病变种中一个假想基因（WP_017704201.1）序列。本发明建立了丁香假单胞菌猕猴桃致病变种的检测方法，包括：提取待测样品基因组DNA，以基因组DNA为模板，用引物组合物进行RAA检测；根据LFD试纸条条带确定待测样品是否含有丁香假单胞菌猕猴桃致病变种。本发明检测方法对丁香假单胞菌猕猴桃致病变种DNA的检测灵敏度最低限为1 pg/μL，对菌悬液最低检测限为1×103 cfu/mL，可为猕猴桃细菌性溃疡病的早期诊断和病害防控提供了新的技术手段。

公开(公告)号：CN110819734B

公开(公告)日：2023-02-28

申请号：CN201911190110.8

申请日：2019-11-28

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 黄丽丽 ,  王一波 ,  徐亮胜

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了苹果树腐烂病菌LAMP扩增引物及苹果树腐烂病检测试剂盒。所公开的引物是针对苹果树腐烂病菌属保守的EF‑1a基因，优选了目的基因片段来设计特异性引物，使得该引物能有效检测苹果树腐烂病菌属，而且特异性好。所公开的试剂盒包括研磨液管、RNA酶液管、核酸提取液A管、核酸提取液B管、核酸提取液C管、LAMP反应液管、Bst DNA聚合酶管、显色剂管、阳性对照核酸管、阴性对照管和矿物油管。本发明的试剂盒及相应检测方法不仅实现了苹果树腐烂病菌的通用检测，而且成本低、灵敏性高、操作简单，同时可实现现场快速检测。

公开(公告)号：CN118633624A

公开(公告)日：2024-09-13

申请号：CN202410663110.X

申请日：2024-05-27

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 黄丽丽 ,  田向荣 ,  齐银银 ,  孙文靖 ,  王园园 ,  张孙奥 ,  冯浩 ,  徐亮胜

IPC: A01N65/00 ,  A01N65/32 ,  A01N65/10 ,  A01N25/30 ,  A01N25/04 ,  A01P3/00

Abstract: 本发明公开了一种农用杀菌中药复配物及其制备方法、应用和农用杀菌液剂，农用杀菌中药复配物包括以下原料：白头翁提取物和蛇床子提取物，白头翁提取物和蛇床子提取物的重量比为(1～9):(1～9)。本发明通过白头翁和蛇床子复配，对农作物病害的防治具有协同增效的作用，不但对苹果树腐烂病菌具有良好的防效，还对猕猴桃溃疡病菌、辣椒疫霉病菌等多种细菌和真菌性病害具有防治效果，具有良好经济开发价值。

公开(公告)号：CN116334297A

公开(公告)日：2023-06-27

申请号：CN202310567895.6

申请日：2023-05-19

Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院

Inventor： 黄丽丽 ,  徐亮胜 ,  张丽霞

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种LAMP扩增引物，其由正向外引物、反向外引物、正向内引物和反向内引物组成，正向外引物的序列如SEQ ID No.1所示，反向外引物的序列如SEQ ID No.2所示，正向内引物的序列如SEQ ID No.3所示，反向内引物的序列如SEQ ID No.4所示。LAMP扩增引物的靶标序列为苹果树褐斑病菌基因组中的ITS‑rDNA基因。本发明LAMP扩增引物及其苹果树褐斑病检测方法，不仅实现了苹果树褐斑菌的通用检测，而且成本低、灵敏性高、操作简单，同时可实现现场快速检测。

公开(公告)号：CN110819734A

公开(公告)日：2020-02-21

申请号：CN201911190110.8

申请日：2019-11-28

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 黄丽丽 ,  王一波 ,  徐亮胜

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了苹果树腐烂病菌LAMP扩增引物及苹果树腐烂病检测试剂盒。所公开的引物是针对苹果树腐烂病菌属保守的EF-1a基因，优选了目的基因片段来设计特异性引物，使得该引物能有效检测苹果树腐烂病菌属，而且特异性好。所公开的试剂盒包括研磨液管、RNA酶液管、核酸提取液A管、核酸提取液B管、核酸提取液C管、LAMP反应液管、Bst DNA聚合酶管、显色剂管、阳性对照核酸管、阴性对照管和矿物油管。本发明的试剂盒及相应检测方法不仅实现了苹果树腐烂病菌的通用检测，而且成本低、灵敏性高、操作简单，同时可实现现场快速检测。

公开(公告)号：CN117247871A

公开(公告)日：2023-12-19

申请号：CN202311302633.3

申请日：2023-10-10

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 黄丽丽 ,  王娜娜 ,  黄静 ,  校怡南 ,  颜霞 ,  徐亮胜

IPC: C12N1/20 ,  A01N63/22 ,  A01N65/10 ,  A01N65/24 ,  A01N65/32 ,  A01N65/20 ,  A01N65/46 ,  A01N65/08 ,  A01N63/30 ,  A01P3/00 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明公开了一株贝莱斯芽孢杆菌及中药复配制剂和在农业上的应用，该菌株于2023年9月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.28339。该中药复方制剂‑生防菌株复合制剂对苹果树腐烂病菌(Valsa mali)的野生型菌株03‑8具有拮抗作用。