公开(公告)号：CN111235075A

公开(公告)日：2020-06-05

申请号：CN202010241074.X

申请日：2020-03-31

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 王新 ,  张鹏飞 ,  白莉 ,  尹安然 ,  高芃 ,  王婷

IPC: C12N1/20 ,  C12N1/02 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种牛粪中非O157产志贺毒素大肠埃希氏菌分离鉴定方法，包括以下步骤：S1，细菌选择培养：将采集的待测样本与EC肉汤培养基进行首次增菌，然后将增菌液以1:8～12的比例转移至新鲜的EC肉汤培养基进行二次增菌；S2，STEC分离：利用PCR扩增并结合麦康凯选择平板对S1中增菌后的细菌样本进行STEC分离；S3，STEC鉴定：将S2中分离得到的阳性单克隆菌株活化于LB平板，然后对活化的菌株进行stx1/2基因扩增、凝胶电泳及成像，显示阳性的，即为STEC菌株；S4，STEC保藏，对S3中PCR鉴定为STEC的菌株进行菌种保藏。本分离鉴定方法简单易操作，通过几次的扩增和鉴定筛选，能够成功的将STEC菌株分离。