公开(公告)号：CN118476475A

公开(公告)日：2024-08-13

申请号：CN202410716380.2

申请日：2024-06-04

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 杨培志 ,  黄淑迪 ,  马方 ,  梁云飞 ,  战祥强 ,  申小霞 ,  夏厚胤

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明涉及植物组织培养技术领域，具体公开了一种紫花苜蓿无菌苗的培养方法，采用紫花苜蓿扦插苗的顶部幼嫩茎段作为外植体，利用质量分数为15‑20％的NaClO溶液进行消毒，利用1/2MS+0.1‑0.2mg/L IBA诱导培养基进行诱导生根培养获得紫花苜蓿无菌苗。本发明提供的方法利用选择合适的消毒剂和诱导培养基不仅显著提高了生根率，还避免了根部发生污染，提高了紫花苜蓿无菌苗的培育成功率。

公开(公告)号：CN117051030A

公开(公告)日：2023-11-14

申请号：CN202310050184.1

申请日：2023-02-01

Applicant: 西北农林科技大学 ,  高景慧 ,  彭嘉文

Inventor： 高景慧 ,  谢长根 ,  谭璐娜 ,  曹玉曼 ,  彭嘉文 ,  李淳 ,  夏厚胤 ,  崔祎琳 ,  马志超 ,  苗愉琪 ,  闫明科 ,  陈礼

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  A01H5/00 ,  A01H6/54

Abstract: 本发明属于紫花苜蓿基因编辑技术领域，具体涉及一种紫花苜蓿CRISPR/Cas9遗传转化体系构建的方法。本发明的目的是弥补目前CRISPR/Cas9技术在紫花苜蓿基因编辑系统建立和体系优化的空缺，提供一种基于CRISPR/Cas9技术的紫花苜蓿高效遗传转化体系，克服在遗传转化过程中编辑植株再生周期长、转化效率低及依赖基因型等问题。本发明的体系不同于传统植物基因编辑遗传转化体系，无需诱导愈伤组织，为紫花苜蓿基因编辑育种及分子水平研究提供重要体系构建技术。特别是可以解决紫花苜蓿难以形成愈伤组织，培养周期长、转化效率低等组织培养技术的瓶颈。本发明提供了一种基于CRISPR/Cas9技术直接使用紫花苜蓿茎尖作为外植体进行双靶点基因编辑遗传转化，包括紫花苜蓿茎尖外植体的制备，双靶点基因编辑载体的构建，外源DNA分子侵染外植体的获取，具有抗性外植体的筛选，带有丛生芽外植体的培养，紫花苜蓿再生编辑植株的获取等步骤。