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公开(公告)号：CN105505980A
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201510960660.9
申请日：2015-12-19
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/82
CPC classification number: C12N15/8206
Abstract: 本发明公开一种含GFP荧光标记质粒转化柳枝稷原生质体的方法，柳枝稷种子播种后生长20天取植株地上部分，切成细丝放入到酶解液中，28℃消化细胞壁5小时；用细胞筛过滤得到含有原生质体细胞的溶液；经过W5溶液洗涤获得健康原生质体细胞。加入荧光标记质粒和转化缓冲液，28℃转化20分钟；除去转化缓冲液，在W5溶液中28℃暗培养16-18小时后，荧光显微镜下进行检测。本发明所述方法具有简单高效的特点，可为柳枝稷基因功能研究提供技术支持。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101144091A
公开(公告)日：2008-03-19
申请号：CN200710018580.7
申请日：2007-09-04
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种采用农杆菌介导法转化获得柳枝稷转基因植株的方法。在进行柳枝稷遗传转化时，以灭菌后萌动的种子为转化受体，采用农杆菌转化和共培养；在筛选培养基SMBP1，SMBP2和SMBP3上依次进行筛选获得抗性芽；将抗性芽在生根培养基SMO中培养成苗；移栽至温室或大田进行分子生物学方法检测，根据分子生物学方法和目标性状筛选获得含有外源目的转基因植株。本发明建立的柳枝稷的转基因方法，克服了农杆菌介导法对组织培养条件依赖性强的缺点，拓宽了遗传转化的基因型范围，简化了转化程序，为利用转基因技术对柳枝稷进行遗传改良提供了一条新的途径。
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公开(公告)号：CN101081005A
公开(公告)日：2007-12-05
申请号：CN200710018261.6
申请日：2007-07-13
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种柳枝稷的体外繁殖方法。具体为在柳枝稷生长发育至有5～6个节时，切取中间3～4个茎节处，在MBP培养基上人工诱导再生芽；对丛生芽生长点人工重复切除处理4～5次至丛生芽块直径为0.5cm左右，在新的MBP培养基上诱导获得较大规模的丛生芽；将再生植株在生根培养基SMO中培养成苗，移栽至温室或大田。本发明建立的柳枝稷的体外繁殖方法，拓宽了柳枝稷组织培养和遗传转化的基因型范围，缩短了培养周期，提高了再生频率，降低了实验成本，同时可以作为柳枝稷转基因后代快速繁殖的有效手段，为生物技术在柳枝稷上的广泛应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN101121940A
公开(公告)日：2008-02-13
申请号：CN200710018260.1
申请日：2007-07-13
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种农杆菌介导转化柳枝稷的方法。利用农杆菌介导转化柳枝稷时，选择人工诱导的幼穗为外植体，在SMB培养基上诱导胚性愈伤组织，采用农杆菌转化和共培养，在筛选培养基SM1和SM2上依次进行筛选获得抗性愈伤组织，将抗性愈伤组织转入分化培养基SMK1和SMK2上依次分化获得再生植株，再生植株在生根培养基SMO中培养成苗，移栽至温室或大田进行分子生物学方法检测，根据分子生物学方法和目标性状筛选获得外源目的基因表达的转基因植株。本发明建立的柳枝稷遗传转化方法，转化效率达到10％左右，为采用转基因方法对生物能源植物柳枝稷的遗传改良奠定了基础。
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公开(公告)号：CN101144091B
公开(公告)日：2011-10-26
申请号：CN200710018580.7
申请日：2007-09-04
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种采用农杆菌介导法转化获得柳枝稷转基因植株的方法。在进行柳枝稷遗传转化时，以灭菌后萌动的种子为转化受体，采用农杆菌转化和共培养；在筛选培养基SMBP1，SMBP2和SMBP3上依次进行筛选获得抗性芽；将抗性芽在生根培养基SMO中培养成苗；移栽至温室或大田进行分子生物学方法检测，根据分子生物学方法和目标性状筛选获得含有外源目的转基因植株。本发明建立的柳枝稷的转基因方法，克服了农杆菌介导法对组织培养条件依赖性强的缺点，拓宽了遗传转化的基因型范围，简化了转化程序，为利用转基因技术对柳枝稷进行遗传改良提供了一条新的途径。
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公开(公告)号：CN101121940B
公开(公告)日：2011-10-26
申请号：CN200710018260.1
申请日：2007-07-13
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种农杆菌介导转化柳枝稷的方法。利用农杆菌介导转化柳枝稷时，选择人工诱导的幼穗为外植体，在SMB培养基上诱导胚性愈伤组织，采用农杆菌转化和共培养，在筛选培养基SM1和SM2上依次进行筛选获得抗性愈伤组织，将抗性愈伤组织转入分化培养基SMK1和SMK2上依次分化获得再生植株，再生植株在生根培养基SM0中培养成苗，移栽至温室或大田进行分子生物学方法检测，根据分子生物学方法和目标性状筛选获得外源目的基因表达的转基因植株。本发明建立的柳枝稷遗传转化方法，转化效率达到10％左右，为采用转基因方法对生物能源植物柳枝稷的遗传改良奠定了基础。
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