微生物发酵法生产枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶的生产工艺

    公开(公告)号:CN101368177A

    公开(公告)日:2009-02-18

    申请号:CN200810231714.8

    申请日:2008-10-13

    Inventor: 安德荣 刘双发

    Abstract: 本发明涉及一种微生物发酵法生产枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶的生产工艺,其采用微生物发酵生产碱性蛋白酶,周期短,营养需求低,提取工艺简单,降低了成本,同时提高了蛋白酶的回收率。本发明包括以下步骤:(1)菌种培养:采用种子培养基对枯草芽孢杆菌种进行扩大培养;(2)发酵培养基配制;(3)发酵:将枯草芽孢杆菌菌种接入摇瓶,进行发酵得发酵液;(4)粗提:发酵液经预处理后离心,脱色,过滤和减压干燥得粗品碱性蛋白酶;(5)精制:粗品经纯化溶解后,盐析,透析,超滤浓缩,凝胶过滤层析,然后干燥浓缩得成品。

    微生物发酵法生产枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶的生产工艺

    公开(公告)号:CN101368177B

    公开(公告)日:2011-03-30

    申请号:CN200810231714.8

    申请日:2008-10-13

    Inventor: 安德荣 刘双发

    Abstract: 本发明涉及一种微生物发酵法生产枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶的生产工艺,其采用微生物发酵生产碱性蛋白酶,周期短,营养需求低,提取工艺简单,降低了成本,同时提高了蛋白酶的回收率。本发明包括以下步骤:(1)菌种培养:采用种子培养基对枯草芽孢杆菌种进行扩大培养;(2)发酵培养基配制;(3)发酵:将枯草芽孢杆菌菌种接入摇瓶,进行发酵得发酵液;(4)粗提:发酵液经预处理后离心,脱色,过滤和减压干燥得粗品碱性蛋白酶;(5)精制:粗品经纯化溶解后,盐析,透析,超滤浓缩,凝胶过滤层析,然后干燥浓缩得成品。

    一种活性物质为枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶的微生物杀虫剂

    公开(公告)号:CN101396025A

    公开(公告)日:2009-04-01

    申请号:CN200810231713.3

    申请日:2008-10-13

    Inventor: 安德荣 刘双发

    Abstract: 本发明涉及一种活性物质为枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶的微生物杀虫剂,其低残留、杀虫谱广、高效、能降解、选择性强。本发明包括以下重量百分比的组分:碱性蛋白酶9%-16%,表面活性剂1%-2%,高渗剂1%-1.5%,增效剂1%-3%,助剂3%-5%,水68%-84%。上述表面活性剂为苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚,助剂为三聚磷酸钠,增效剂由氯化镁、亚硫酸钠、硝酸铵、蔗糖和5种原料中的2种或2种以上的原料组配而成,所含各种原料及其重量比为亚硫酸钠∶硝酸铵∶尿素=25~52∶8~15∶25~35;还掺入微量的碱金属盐类MgCl2或K2O3等作为添加剂。

    一种蛋白酶高产菌株LSF-An-63的筛选方法

    公开(公告)号:CN101508958A

    公开(公告)日:2009-08-19

    申请号:CN200910021612.8

    申请日:2009-03-19

    Inventor: 安德荣 刘双发

    Abstract: 本发明涉及一种蛋白酶高产菌株LSF-An-63的筛选方法,其采用酪蛋白初筛和弹性蛋白复筛,选择性强,效率高,所得菌株具备作为工业菌株的能力。本发明具体筛选过程为:(1)采样:样品采自农场的秸秆;(2)纯化:样品处理后采用涂布稀释法获得单菌落;(3)初筛:选用以酪蛋白(脱脂奶粉)为底物的培养基进行初筛;(4)复筛:选用以弹性蛋白(牛筋)为底物的培养基进行复筛。

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