公开(公告)号：CN119643525A

公开(公告)日：2025-03-18

申请号：CN202411815391.2

申请日：2021-03-08

Applicant: 苏州大学附属第一医院

Inventor： 高芹芹 ,  孙淼 ,  徐婷 ,  周秀文 ,  徐智策 ,  丁红梅

IPC: G01N21/64 ,  G01N1/30

Abstract: 本发明公开了一种利用全内反射荧光显微成像系统实时动态监测内皮细胞释放一氧化氮的方法，包括以下步骤：(1)分离血管内皮细胞并进行鉴定；(2)待内皮细胞加入细胞培养皿中贴壁培养；(3)将DAF‑FM避光孵育内皮细胞；(4)进行荧光检测实验；(5)打开TIRFM‑EMCCD机器系统上的NIS‑Elements AR软件，设置好主要参数；(6)记录细胞荧光值变化，等荧光值趋于稳定后开始加入Ach，通过荧光值变化观察细胞对Ach的动态反应；(7)实验结束后将实验数据进行分析作图。本发明首次将DAF‑FM和TIRFM相结合，发现一种可以实时动态检测活细胞NO合成能力、并且能够对其进行相对定量的实验方法。

公开(公告)号：CN113030046A

公开(公告)日：2021-06-25

申请号：CN202110251463.5

申请日：2021-03-08

Applicant: 苏州大学附属第一医院

Inventor： 高芹芹 ,  孙淼 ,  徐婷 ,  周秀文 ,  徐智策 ,  丁红梅

IPC: G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种利用全内反射荧光显微成像系统实时动态监测内皮细胞释放一氧化氮的方法，包括以下步骤：（1）分离血管内皮细胞并进行鉴定；（2）待内皮细胞加入细胞培养皿中贴壁培养；（3）将DAF‑FM避光孵育内皮细胞；（4）进行荧光检测实验；（5）打开TIRFM‑EMCCD机器系统上的NIS‑Elements AR软件，设置好主要参数；（6）记录细胞荧光值变化，等荧光值趋于稳定后开始加入Ach，通过荧光值变化观察细胞对Ach的动态反应；（7）实验结束后将实验数据进行分析作图。本发明首次将DAF‑FM和TIRFM相结合，发现一种可以实时动态检测活细胞NO合成能力、并且能够对其进行相对定量的实验方法。

公开(公告)号：CN117092083A

公开(公告)日：2023-11-21

申请号：CN202311075213.6

申请日：2023-08-25

Applicant: 山东省妇幼保健院 ,  苏州大学附属第一医院

Inventor： 高芹芹 ,  徐婷 ,  张美华 ,  孙淼 ,  吉冰玉 ,  李凌君 ,  丁红梅 ,  雷佳惠 ,  邓风盈

IPC: G01N21/64 ,  G01N33/84

Abstract: 本发明公开了利用荧光显微成像系统实时监测细胞内K+变化的方法，包括以下步骤：将培养的细胞经胰酶消化后种植到玻底培养皿中进行贴壁；将细胞避光孵育PBFI‑AM荧光探针，同时加入0.04％的Pluronic P‑127；进行荧光检测实验；打开TIRFM‑EMCCD机器系统上的NIS‑Elements AR软件，设置好主要参数；记录细胞荧光值变化，等荧光值趋于稳定后，开始加入KCl，通过荧光值变化观察细胞对KCl的动态反应；实验结束后将实验数据进行分析作图。本发明所述的利用荧光显微成像系统实时监测细胞内K+变化的方法，将PBFI‑AM和TIRFM相结合，发现一种可以实时动态监测细胞摄取K+的能力，并且能够对其进行相对定量的实验方法。